| 查看: 1502 | 回复: 13 | ||
yitiandeng木虫 (著名写手)
|
[求助]
求助具体的（具体的）无连接酶亚克隆法全步骤，从PCR到克隆
|
|
无连接酶亚克隆法 ，请亲们看好说明啊，别解释原理什么的[ Last edited by yitiandeng on 2012-4-8 at 15:52 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
阴阳离子交换剂！！！！
已经有3人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酸接酚羟基，
已经有11人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有154人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酰氯
已经有10人回复
-
酸酐或者羧酸酰氯化
已经有15人回复
-
酚羟基接入磷酸，磷酸酯化
已经有26人回复
-
土壤中可溶性有机碳种类
已经有1人回复
-
韩国海关检测食用植物油中的苯并芘用的是哪种方法？
已经有0人回复
-
现有pP43NMK质粒，想换了pHT43，或者其他芽孢杆菌过表达质粒
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助各位虫子，用溴素做溴代可以用苯做溶剂先稀释溴素吗
已经有3人回复
- 求助1段话的英译汉，是关于冠脉支架的-谢谢
已经有2人回复
- DNA提取求助
已经有14人回复
- 膜渗透装置求助~~
已经有27人回复
- 求助：面包酵母或植物全细胞生物催化芳香酮这一方向，哪些期刊这方面做的比较多
已经有6人回复
- 【求助】请教各位用气相色谱分离脂肪酸的问题
已经有6人回复
- 【有奖活动】常来环境版的虫子们都具体从事什么职业，已投票数94。
已经有134人回复
- 求助吡啶-4-甲醛衍生物的合成
已经有5人回复
- ZSM-5合成被烧问题求助？
已经有9人回复
- 荧光发射光谱基线很高。。。求助。。。
已经有8人回复
- 【求助】 HPLC流速跟峰高及峰面积的关系~~~
已经有10人回复
- PCR求助
已经有7人回复
- 急求RT-PCR电泳图分析
已经有22人回复
- 求助：PCR扩增片段测序结果引物中间多出150bp的片段
已经有5人回复
- 实时荧光RT-PCR实验的相关问题
已经有8人回复
- 【求助！急】想問下照片上是什麽植物，最好能具體點的。。。。
已经有10人回复
- 我想将pcr片段转入大肠杆菌内
已经有19人回复
- PCR植物基因组DNA，为什么就一直P不出来捏
已经有34人回复
scienzyme
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 12459.9
- 红花: 2
- 帖子: 1412
- 在线: 338.7小时
- 虫号: 137301
- 注册: 2005-12-17
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yitiandeng: 金币+30, 18 2012-04-08 20:19:37
感谢参与，应助指数 +1
yitiandeng: 金币+30, 18 2012-04-08 20:19:37
| 提供三篇相关文献，希望对楼主有帮助。 |
» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：libolin3@tal.com - 附件 1 : 2012 张晓舟Simple Cloning via Direct Transformation of PCR Product.pdf
- 附件 2 : 重点 Successive hybridization assembly.rar
- 附件 3 : 2009 Circular Polymerase Extension Cloning of Complex Gene.pdf
2012-04-08 19:50:53, 968.37 K
2012-04-08 19:51:25, 2.83 M
2012-04-08 19:51:31, 278.69 K
5楼2012-04-08 19:52:20
12楼2012-10-13 18:06:49
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
2楼2012-04-08 15:56:30
lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 363 (硕士)
- 金币: 7752.3
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 751
- 在线: 188.2小时
- 虫号: 819723
- 注册: 2009-07-31
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
3楼2012-04-08 17:10:22
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
4楼2012-04-08 18:16:12
yitiandeng
木虫 (著名写手)
- 应助: 45 (小学生)
- 金币: 2863
- 散金: 1323
- 红花: 4
- 帖子: 1224
- 在线: 317.2小时
- 虫号: 667147
- 注册: 2008-12-03
- 专业: 军事学其他学科
6楼2012-04-08 20:18:18
yitiandeng
木虫 (著名写手)
- 应助: 45 (小学生)
- 金币: 2863
- 散金: 1323
- 红花: 4
- 帖子: 1224
- 在线: 317.2小时
- 虫号: 667147
- 注册: 2008-12-03
- 专业: 军事学其他学科
7楼2012-04-08 20:20:21
1527017653
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 523.6
- 红花: 1
- 帖子: 409
- 在线: 13.4小时
- 虫号: 1671864
- 注册: 2012-03-07
- 性别: MM
- 专业: 会计与审计
| 通常情况下，PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接，但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性，能在两6条DNA链的3'末端加上一个多余的碱基，使合成的PCR产物成为3'突出一个碱基的DNA分子。这种DNA分子的连接效率很低。由于PCR产物的效率通过较高，。在采用大量T4DNA连接酶并配以5-10u T4 RNA连接酶时，可显著提高其连接效率。对于较短PCR产物，用PUS19的HincⅡ位点进行克隆，以X－gal和IPTG筛选，常可得到足量重组子。另一种提高克隆效率的途径是先用Klenow大片段或T4DNA聚合酶消去3'末端突出碱基将PCR产物变成平端DNA，然后再用平端连接法克隆PCR产物。 |
8楼2012-04-08 21:01:32
eileen8519
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1420.4
- 散金: 18
- 红花: 1
- 帖子: 241
- 在线: 75.5小时
- 虫号: 802150
- 注册: 2009-07-02
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
9楼2012-04-09 11:37:18
sxxuan
金虫 (著名写手)
- MolEPI: 4
- 应助: 107 (高中生)
- 金币: 3442.4
- 散金: 104
- 红花: 17
- 帖子: 1478
- 在线: 266.1小时
- 虫号: 512865
- 注册: 2008-02-27
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
10楼2012-04-11 11:04:07
5