| 查看: 2744 | 回复: 13 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
yitiandeng木虫 (著名写手)
|
[求助]
求助具体的（具体的）无连接酶亚克隆法全步骤，从PCR到克隆
|
||
无连接酶亚克隆法 ，请亲们看好说明啊，别解释原理什么的[ Last edited by yitiandeng on 2012-4-8 at 15:52 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有181人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助各位虫子，用溴素做溴代可以用苯做溶剂先稀释溴素吗
已经有3人回复
- 求助1段话的英译汉，是关于冠脉支架的-谢谢
已经有2人回复
- DNA提取求助
已经有14人回复
- 膜渗透装置求助~~
已经有27人回复
- 求助：面包酵母或植物全细胞生物催化芳香酮这一方向，哪些期刊这方面做的比较多
已经有6人回复
- 【求助】请教各位用气相色谱分离脂肪酸的问题
已经有6人回复
- 【有奖活动】常来环境版的虫子们都具体从事什么职业，已投票数94。
已经有134人回复
- 求助吡啶-4-甲醛衍生物的合成
已经有5人回复
- ZSM-5合成被烧问题求助？
已经有9人回复
- 荧光发射光谱基线很高。。。求助。。。
已经有8人回复
- 【求助】 HPLC流速跟峰高及峰面积的关系~~~
已经有10人回复
- 急求RT-PCR电泳图分析
已经有22人回复
- 求助：PCR扩增片段测序结果引物中间多出150bp的片段
已经有5人回复
- 实时荧光RT-PCR实验的相关问题
已经有8人回复
- 【求助！急】想問下照片上是什麽植物，最好能具體點的。。。。
已经有10人回复
- 我想将pcr片段转入大肠杆菌内
已经有19人回复
1527017653
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 523.6
- 红花: 1
- 帖子: 409
- 在线: 13.4小时
- 虫号: 1671864
- 注册: 2012-03-07
- 性别: MM
- 专业: 会计与审计
| 通常情况下，PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接，但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性，能在两6条DNA链的3'末端加上一个多余的碱基，使合成的PCR产物成为3'突出一个碱基的DNA分子。这种DNA分子的连接效率很低。由于PCR产物的效率通过较高，。在采用大量T4DNA连接酶并配以5-10u T4 RNA连接酶时，可显著提高其连接效率。对于较短PCR产物，用PUS19的HincⅡ位点进行克隆，以X－gal和IPTG筛选，常可得到足量重组子。另一种提高克隆效率的途径是先用Klenow大片段或T4DNA聚合酶消去3'末端突出碱基将PCR产物变成平端DNA，然后再用平端连接法克隆PCR产物。 |
8楼2012-04-08 21:01:32
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
2楼2012-04-08 15:56:30
lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 363 (硕士)
- 金币: 7753.3
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 751
- 在线: 189.4小时
- 虫号: 819723
- 注册: 2009-07-31
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
3楼2012-04-08 17:10:22
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
4楼2012-04-08 18:16:12
