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gjywx1990

铜虫 (小有名气)

[求助] 【求助】 HPLC流速跟峰高及峰面积的关系~~~

昨天做HPLC方法学耐用性时,改变流速,发现峰高和峰面积都变化了很大~~~
流速增加,峰高降低,峰面积减少,流速减小则相反。之前看论坛帖子都说流速不会影响峰高,只会影响峰面积,但我这峰高也变化较大。
检测器是紫外灯,流动相是甲醇和水相(里面有庚烷磺酸钠和十二烷基硫酸钠,醋酸调PH)。求各位老师指导啊~~~
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离别之殇
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo: 金币+1, 感谢应助 ^^ 2012-04-02 11:56:41
浓度型检测器在一定浓度范围(线性范围)内,响应值R(检测信号)大小与流动相中被测组分浓度成正比(R∝C)。浓度型检测器当进样量一定时,瞬间响应值(峰高)与流动相流速无关,而积分响应值(峰面积)与流动相流速成反比,峰面积与流动相流速的乘积为一常数。绝大部分检测器都是浓度型检测器,如:热导池检测器(TCD)、电子捕获检测器(ECD)、液相色谱法中的紫外-可见光检测器(UVD)、电导检测器与荧光检测器也是浓度型检测器。
除非条件改变或耐用性不行,不然峰高不会有明显变化。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

守候在风中的宁静。
6楼2012-04-02 00:39:42
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普通回帖

kitaro

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
padodo: 金币+1, 感谢应助! 2012-03-30 13:23:06
流速增加,相当于浓度降低,所以峰高会变低,面积会小。
2楼2012-03-30 10:54:56
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lflaile

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我做的实验也是这样的,流速增加,峰面积和峰高都有所降低,峰高跟峰面积的变化是呈现一定的比例关系的。
不以物喜,不以己悲
3楼2012-03-30 16:22:59
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winnie的爱

木虫 (著名写手)

Mr?W逍遥

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是耐用性不好呢
峰高峰面积变化是正常的  不过不知道LZ说的很大是什么概念  我的印象中这个变化也不会很离谱的啊
4楼2012-03-31 11:30:31
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河海无云

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gjywx1990: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 回去我再考察下耐用性吧~~ 2012-04-05 10:43:30
紫外检测器属于浓度型检测器,如果进样量一定,样品浓度不变的话,流速增加峰面积减小属于正常,但是峰高应该不会有太明显的变化。楼主是否有其他条件的变化?
5楼2012-04-01 11:28:48
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

我觉着是峰面积不变,峰高会发生较大的差异,这个我试过,同一个样品在不同流速下峰宽有较大的差异,这个差异是符合幂函数的。可能你积分的时候有部分基线没有积上去。
7楼2013-08-19 14:08:57
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uio1434

铜虫 (小有名气)

流速变化会影响峰形和分离度的。流速越小越好,但是一般为了节省分析时间。都用比最佳流速大一点的流速。
艰苦朴素,充满希望 forward
8楼2013-08-20 14:15:55
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hr.wu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kitaro at 2012-03-30 10:54:56
流速增加,相当于浓度降低,所以峰高会变低,面积会小。

以前一直没想明白,原来是这样。
9楼2015-02-07 17:15:48
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

流速改变,你所有组分的峰面积都是同比例变化,你做耐用性可以考察各组分峰面积所占比例变化有没有变化。
快乐不需要走遍天涯去寻找,只需播一粒种子在脚下。
10楼2015-02-09 09:35:52
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