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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】 HPLC流速跟峰高及峰面积的关系~~~
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gjywx1990

铜虫 (小有名气)

[求助] 【求助】 HPLC流速跟峰高及峰面积的关系~~~

昨天做HPLC方法学耐用性时，改变流速，发现峰高和峰面积都变化了很大~~~
流速增加，峰高降低，峰面积减少，流速减小则相反。之前看论坛帖子都说流速不会影响峰高，只会影响峰面积，但我这峰高也变化较大。
检测器是紫外灯，流动相是甲醇和水相（里面有庚烷磺酸钠和十二烷基硫酸钠，醋酸调PH）。求各位老师指导啊~~~
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离别之殇
1楼 2012-03-30 09:59:30
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+1, 感谢应助 ^^ 2012-04-02 11:56:41
浓度型检测器在一定浓度范围（线性范围）内，响应值R（检测信号）大小与流动相中被测组分浓度成正比（R∝C）。浓度型检测器当进样量一定时，瞬间响应值（峰高）与流动相流速无关，而积分响应值（峰面积）与流动相流速成反比，峰面积与流动相流速的乘积为一常数。绝大部分检测器都是浓度型检测器，如：热导池检测器(TCD)、电子捕获检测器(ECD)、液相色谱法中的紫外-可见光检测器(UVD)、电导检测器与荧光检测器也是浓度型检测器。
除非条件改变或耐用性不行，不然峰高不会有明显变化。
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imuyer
守候在风中的宁静。
6楼2012-04-02 00:39:42
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普通回帖

kitaro

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
padodo: 金币+1, 感谢应助！ 2012-03-30 13:23:06
流速增加，相当于浓度降低，所以峰高会变低，面积会小。
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2楼2012-03-30 10:54:56
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lflaile

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做的实验也是这样的，流速增加，峰面积和峰高都有所降低，峰高跟峰面积的变化是呈现一定的比例关系的。
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不以物喜，不以己悲
3楼2012-03-30 16:22:59
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winnie的爱

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是耐用性不好呢
峰高峰面积变化是正常的  不过不知道LZ说的很大是什么概念  我的印象中这个变化也不会很离谱的啊
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4楼2012-03-31 11:30:31
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河海无云

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gjywx1990: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 回去我再考察下耐用性吧~~ 2012-04-05 10:43:30
紫外检测器属于浓度型检测器，如果进样量一定，样品浓度不变的话，流速增加峰面积减小属于正常，但是峰高应该不会有太明显的变化。楼主是否有其他条件的变化？
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5楼2012-04-01 11:28:48
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
我觉着是峰面积不变，峰高会发生较大的差异，这个我试过，同一个样品在不同流速下峰宽有较大的差异，这个差异是符合幂函数的。可能你积分的时候有部分基线没有积上去。
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7楼2013-08-19 14:08:57
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uio1434

铜虫 (小有名气)
流速变化会影响峰形和分离度的。流速越小越好，但是一般为了节省分析时间。都用比最佳流速大一点的流速。
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艰苦朴素，充满希望 forward
8楼2013-08-20 14:15:55
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hr.wu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kitaro at 2012-03-30 10:54:56
流速增加，相当于浓度降低，所以峰高会变低，面积会小。

以前一直没想明白，原来是这样。
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9楼2015-02-07 17:15:48
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)
流速改变，你所有组分的峰面积都是同比例变化，你做耐用性可以考察各组分峰面积所占比例变化有没有变化。
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快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
10楼2015-02-09 09:35:52
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