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star1987

木虫 (著名写手)

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在线: 235.5小时
虫号: 859783

[交流] 【求助/交流】PCR问题求助

请教高手一个问题，我做PCR的时候用上海生工DNA Taq polymerase（红盖子的）（退火温度梯度从45度到65度）都能P出来，而且条带很亮，但是用LA Taq polymerase、Ex Taq polymerase和Prime Star都P不出来。这是什么原因？

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1楼 2010-12-21 15:28:59

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yabxxh

木虫 (正式写手)

★
star1987(金币+1): 2010-12-21 16:50:00
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-21 19:07:37

高保真的酶有着其特殊性，保真性能高了，PCR效率就会低，同样的条件肯定不行。
我拿Prime Star来说吧，这个我用的多些。
普通的Taq，退火时间一般为30s，但是这个酶就比较特殊，退火时间10s，我扩增3k的片段照样退火10s，这时候如果你用普通程序肯定做不出来。
建议好好研究一下各个酶的说明书，你会有很大收获的，呵呵，好运