| 查看: 1545 | 回复: 4 | |||
xzd5517520铜虫 (初入文坛)
|
[交流]
【求助/交流】关于降落pcr的问题！ 已有4人参与
|
| 请教各位大侠：什么时候要做降落pcr??还有就是在pcr仪上是怎么设计的？？求教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
308求调剂
已经有4人回复
-
NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗
已经有14人回复
-
材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐
已经有6人回复
-
化学调剂0703
已经有7人回复
-
327求调剂
已经有11人回复
-
调剂
已经有8人回复
-
梁成伟老师课题组欢迎你的加入
已经有7人回复
-
伙伴们，祝我生日快乐吧
已经有24人回复
-
中科院材料273求调剂
已经有3人回复
-
材料工程专硕274一志愿211求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 酵母菌落PCR的方法
已经有15人回复
- 关于PCR拖尾现象
已经有23人回复
- 降落PCR一直 跑不出来（用于DGGE）
已经有16人回复
- 关于转化、菌落PCR
已经有8人回复
- 微生物多样性研究的几个问题
已经有10人回复
- 降落PCR和梯度PCR
已经有3人回复
- 【求助/交流】菌落PCR问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】土壤细菌多样性，引物F357GC R518 PCR老是出问题，求救！
已经有11人回复
- 【求助/交流】菌落PCR问题
已经有23人回复
- 【求助/交流】关于菌落PCR
已经有12人回复
- 【求助/交流】关于酵母菌落PCR
已经有8人回复
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+5):good! 2010-09-12 22:22:38
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+5):good! 2010-09-12 22:22:38
|
降落PCR，主要用于PCR的条件的优化。在许多情况下引物的设计使得PCR难以进行，例如特异性不够易错配等。退火温度过高会使PCR效率过低，但退火温度过低则会使非特异扩增过多。这虽然可以通过反复尝试来优化，但费时费力。降落PCR提供了一个较为简易的优化方法。其原理大致是这样的。首先在较高的温度下扩增，此时虽然扩增效率低，但非特异扩增基本没有。随着退火温度的降低，非特异扩增会逐步增多。但由于此时特异的扩增产物已经达到一定的数量优势，因此会对非特异扩增产生强烈的竞争抑制，从而大幅提高PCR的特异性和效率。这一PCR技术已经大量地进入医疗临床应用。现在，以高通量PCR为基础的检测方法、如人的 HLA分型 大多采用这一技术。 一般的PCR仪上，都可以通过每一次循环降低一定退火温度的方式来实现，具体的看一下仪器说明书就明白了，呵呵，不难的。  |
2楼2010-09-12 20:45:01
yujiaping1
木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1365.2
- 散金: 10
- 红花: 5
- 帖子: 1174
- 在线: 66.6小时
- 虫号: 929883
- 注册: 2009-12-17
- 性别: MM
- 专业: 疫苗学
3楼2010-09-12 22:16:12
hongyuan1016
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 55.5
- 红花: 1
- 帖子: 21
- 在线: 8.5小时
- 虫号: 1040613
- 注册: 2010-06-12
- 专业: 动物生理及行为学
4楼2010-09-14 16:43:39
wjswj
木虫 (正式写手)
小木虫领金币专业户
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 2591.2
- 散金: 12
- 红花: 2
- 帖子: 692
- 在线: 45.3小时
- 虫号: 493165
- 注册: 2008-01-10
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
|
相比之下还是认为二楼的对。非特异的东西会越来越多，而不会被选择掉，PCR的优势（可怕之处）就在于会几何级的增加。 请参考：http://baike.baidu.com/view/2200786.html?tp=4_01 |
5楼2010-09-14 17:01:52
