应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 降落PCR和梯度PCR
41/1返回列表
查看: 2309  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

yicao917

木虫 (小有名气)

[交流] 降落PCR和梯度PCR

大家有没有遇到梯度PCR扩的好而降落PCR扩不好或扩不出来的情况啊
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-10-07 20:10:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红多多

木虫 (正式写手)
★
yicao917(金币+1):谢谢参与
1949stone(MolEPI+1): 鼓励 2011-10-07 23:28:22
呵呵 这个非常符合降落PCR的行为特征啊 降落的是每个循环或者隔几个循环退火温度降低一点的 这种情况就是刚开始退火温度高，非特异性扩增几乎没有，但是扩增效率是非常低，慢慢的退火温度下降了，扩增效率会高一点，但是非特异扩增就来了，总之整个过程中就是扩增效率慢慢变高，但是非特异扩增也慢慢变多，反应在你PCR结果就是你的引物被很多不必要的非特异性扩增浪费了。于是你看到的就是什么都没有，其实理论上应该是有的，但是量上面嘛，明显是不够的。降落pcr无非就是梯度PCR摸条件的偷懒版本，有时候样品比较少什么的才用，我一般也就做RACE的时候用用。你要是实在要用降落，提高引物浓度试试。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-10-07 22:21:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yicao917

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 红多多 at 2011-10-07 22:21:05:
呵呵 这个非常符合降落PCR的行为特征啊 降落的是每个循环或者隔几个循环退火温度降低一点的 这种情况就是刚开始退火温度高，非特异性扩增几乎没有，但是扩增效率是非常低，慢慢的退火温度下降了，扩增效率会高一点 ...

对于降落提高酶浓度或者增加循环数来增加产量可行吗？
赞一下 回复此楼
3楼2011-10-08 11:45:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红多多

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yicao917 at 2011-10-08 11:45:11:
对于降落提高酶浓度或者增加循环数来增加产量可行吗？

可以试试，这个又不麻烦……
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-08 11:47:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yicao917 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭