| 查看: 1548 | 回复: 4 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
xzd5517520铜虫 (初入文坛)
|
[交流]
【求助/交流】关于降落pcr的问题！ 已有4人参与
|
||
| 请教各位大侠：什么时候要做降落pcr??还有就是在pcr仪上是怎么设计的？？求教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
考研调剂
已经有5人回复
-
267一志愿南京工业大学0817化工求调剂
已经有6人回复
-
293求调剂
已经有4人回复
-
285化工学硕求调剂（081700）
已经有7人回复
-
302求调剂
已经有8人回复
-
08工科 320总分 求调剂
已经有3人回复
-
290求调剂
已经有9人回复
-
271求调剂
已经有13人回复
-
本人考085602 化学工程 专硕
已经有16人回复
-
304求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 酵母菌落PCR的方法
已经有15人回复
- 关于PCR拖尾现象
已经有23人回复
- 降落PCR一直 跑不出来（用于DGGE）
已经有16人回复
- 关于转化、菌落PCR
已经有8人回复
- 微生物多样性研究的几个问题
已经有10人回复
- 降落PCR和梯度PCR
已经有3人回复
- 【求助/交流】菌落PCR问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】土壤细菌多样性，引物F357GC R518 PCR老是出问题，求救！
已经有11人回复
- 【求助/交流】菌落PCR问题
已经有23人回复
- 【求助/交流】关于菌落PCR
已经有12人回复
- 【求助/交流】关于酵母菌落PCR
已经有8人回复
hongyuan1016
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 55.5
- 红花: 1
- 帖子: 21
- 在线: 8.5小时
- 虫号: 1040613
- 注册: 2010-06-12
- 专业: 动物生理及行为学
4楼2010-09-14 16:43:39
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+5):good! 2010-09-12 22:22:38
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+5):good! 2010-09-12 22:22:38
|
降落PCR，主要用于PCR的条件的优化。在许多情况下引物的设计使得PCR难以进行，例如特异性不够易错配等。退火温度过高会使PCR效率过低，但退火温度过低则会使非特异扩增过多。这虽然可以通过反复尝试来优化，但费时费力。降落PCR提供了一个较为简易的优化方法。其原理大致是这样的。首先在较高的温度下扩增，此时虽然扩增效率低，但非特异扩增基本没有。随着退火温度的降低，非特异扩增会逐步增多。但由于此时特异的扩增产物已经达到一定的数量优势，因此会对非特异扩增产生强烈的竞争抑制，从而大幅提高PCR的特异性和效率。这一PCR技术已经大量地进入医疗临床应用。现在，以高通量PCR为基础的检测方法、如人的 HLA分型 大多采用这一技术。 一般的PCR仪上，都可以通过每一次循环降低一定退火温度的方式来实现，具体的看一下仪器说明书就明白了，呵呵，不难的。  |
2楼2010-09-12 20:45:01
yujiaping1
木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1365.2
- 散金: 10
- 红花: 5
- 帖子: 1174
- 在线: 66.6小时
- 虫号: 929883
- 注册: 2009-12-17
- 性别: MM
- 专业: 疫苗学
3楼2010-09-12 22:16:12
wjswj
木虫 (正式写手)
小木虫领金币专业户
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 2591.2
- 散金: 12
- 红花: 2
- 帖子: 692
- 在线: 45.3小时
- 虫号: 493165
- 注册: 2008-01-10
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
|
相比之下还是认为二楼的对。非特异的东西会越来越多，而不会被选择掉，PCR的优势（可怕之处）就在于会几何级的增加。 请参考：http://baike.baidu.com/view/2200786.html?tp=4_01 |
5楼2010-09-14 17:01:52
5