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star1987

木虫 (著名写手)

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[交流] 【求助/交流】PCR问题求助

请教高手一个问题，我做PCR的时候用上海生工DNA Taq polymerase（红盖子的）（退火温度梯度从45度到65度）都能P出来，而且条带很亮，但是用LA Taq polymerase、Ex Taq polymerase和Prime Star都P不出来。这是什么原因？

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1楼 2010-12-21 15:28:59

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star1987

木虫 (著名写手)

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引用回帖:

Originally posted by rioarsenal at 2010-12-21 22:10:43:

楼主做的是平行试验么？用同样的模板（同一个DNA样品）做模板，不同的酶做的PCR么？最好上一个模板DNA的图，大家研究研究

是平行试验，模板序列如下：
ATGTGTTCTTCAATGACAATTAAATCGCTACAAGGTGATATTTTCTGGGGCCGGACCATGGATTACAACACCAGTTTCTTTCATGAATCACCAGTCGGCGGGGTTCCTGGTAAAATTGTCAGTTTGCCAGCAAACAAGGCATTACCAACACAAAGTGCCAAATGGACCACAAAGTATGCAGCGGTTGGCGTCGGTATTGATCAAAGTACGGCACTTTTCGACGGCGTCAATAGCGAAGGCTTGGCTGGCGACTTGCAGGTTTTGGTAGAGTGCAGCTGGGCGAGTGCGGATTCTTTGAAACAGCGTGGGCTGAAAGCTATTAAAGGCGAGGAGTTTGTGACCTTGGCCTTGACGACATGCAAAAATGTTGACGAAGTACGCGCTTTGGCGGGTGAGTATGGCCTGCTGGATGAACCTTATGAGTTTGGCGGCCAAGGGGTGAAAATCCCATTACATTACACATTTGTTGATCCATCAGGTAAGGGGATTGTTGTCGAACCAACCGATCACGGCGCCTTTAAGCTGTATGATAGCATCGGCGCCATGACGAATAGTCCTGAATACGGGTGGCATGAAACCAATTTGCGCAATTATGTCAGTCTGAATGACAATAACTATCCTAAGGGGTCCGAATTAGGCGACTACCATATTGAGCCGATTGAGTTAGGCACAGGCTACGGGATGTTCGGTTTGCCAGGCGATTACACATCACCATCGCGGTTTCTGCGGGCAATGTTTGTTTCGCGTAATCTTGATCCCTTCAATAGCAAAGACGGCATTCGCGTATTATACAATGCTTTCAAGACTGTCTTGATTCCGCAGGGGCTAGGTCGCGACCCACAACATCAGGTTTTAACGGATTACACGCAGTACTGGTCTGGCTATGATCTGACGAAAAAGACAATTTTCGTGCAAGATTCAGACACATTGACAATGACAACGAAAACACTTGATCCGACTATTACTGACGTCACTTATGAAGATTTGGCTAAAACTGAACAGTTCAATCAACTGTAG
上游引物：CGGGATCCGATGTGTTCTTCAATGACAATTAAATCGC
下游引物：CCCAAGCTTCTACAGTTGATTGAACTGTTCAGTTTTAGC