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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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急躁的小脾气

新虫 (初入文坛)

[求助] QPCR溶解曲线问题

求助大神。。。
开始我用普通PCR跑了这对引物,也跑了胶,结果还蛮好的,没有引物二聚体和非特异性,产物长度也是对的,283bp。
但是用QPCR做了之后,大多数溶解曲线出现双峰,还有的峰的位置都变了。
求大神赐教,我这种情况是样本被污染了吗?

QPCR溶解曲线问题
AC07F37566F8953944E91A807B6F2A8D.jpg@biostar2009
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急躁的小脾气

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 深海看星 at 2017-04-10 16:53:36
有的时候普通p跑出来的qpcr也不一定能跑出来。普通p只是大概看下引物特异性。

嗯   的确是这样    但是我这个情况貌似和样本也有关系,毕竟有些样本的溶解曲线是正常的,但大部分样本p出来的出现的可能是引物二聚体。
9楼2017-04-11 08:47:11
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idealgas

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-12 22:13:11
确切说qPCR条件跟普通pcr条件不一样,检测精度也不一样,经验告诉我用普通pcr检测q的不能说明什么问题。另外电泳的检测灵敏度也可能看不到非特异性扩增产生的条带,而

发自小木虫Android客户端
2楼2017-04-10 16:46:38
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深海看星

新虫 (初入文坛)

有的时候普通p跑出来的qpcr也不一定能跑出来。普通p只是大概看下引物特异性。

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-04-10 16:53:36
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急躁的小脾气

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by idealgas at 2017-04-10 16:46:38
确切说qPCR条件跟普通pcr条件不一样,检测精度也不一样,经验告诉我用普通pcr检测q的不能说明什么问题。另外电泳的检测灵敏度也可能看不到非特异性扩增产生的条带,而
...

那我的结果里有些溶解曲线是可取的,这几条能用吗?

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-04-10 21:51:40
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