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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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upgo123

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量qPCR内参基因的CT问题及熔解曲线 已有1人参与

大家好,小弟最近做荧光定量PCR,相对定量,SYBR GREEN I,发现两个问题:
1,内参基因的CT值为24,大于目的基因的CT值20,结果能用吗?为什么?
2,有一个目的基因(不是上述目的基因)的溶解温度为93℃,结果能用吗?为什么?
网大侠不吝赐教,谢谢!
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苯苯兔

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
upgo123: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢,我已经做了,可是93℃那个平行性不理想 2015-12-10 11:06:04
1、结果可用,并没有关系。
2、这样看来你这条目的基因片段很长或者说GC含量高,这其实都是要避免的(可能潜在增加二级结构的复杂i性),而且这个温度接近做溶解曲线的最高温(95度),建议避免使用。
2楼2015-12-09 18:32:13
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