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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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急躁的小脾气

新虫 (初入文坛)

[求助] QPCR溶解曲线问题

求助大神。。。
开始我用普通PCR跑了这对引物,也跑了胶,结果还蛮好的,没有引物二聚体和非特异性,产物长度也是对的,283bp。
但是用QPCR做了之后,大多数溶解曲线出现双峰,还有的峰的位置都变了。
求大神赐教,我这种情况是样本被污染了吗?

QPCR溶解曲线问题
AC07F37566F8953944E91A807B6F2A8D.jpg@biostar2009
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深海看星

新虫 (初入文坛)

有的时候普通p跑出来的qpcr也不一定能跑出来。普通p只是大概看下引物特异性。

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-04-10 16:53:36
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idealgas

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-12 22:13:11
确切说qPCR条件跟普通pcr条件不一样,检测精度也不一样,经验告诉我用普通pcr检测q的不能说明什么问题。另外电泳的检测灵敏度也可能看不到非特异性扩增产生的条带,而

发自小木虫Android客户端
2楼2017-04-10 16:46:38
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急躁的小脾气

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by idealgas at 2017-04-10 16:46:38
确切说qPCR条件跟普通pcr条件不一样,检测精度也不一样,经验告诉我用普通pcr检测q的不能说明什么问题。另外电泳的检测灵敏度也可能看不到非特异性扩增产生的条带,而
...

那我的结果里有些溶解曲线是可取的,这几条能用吗?

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-04-10 21:51:40
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idealgas

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 急躁的小脾气 at 2017-04-10 21:51:40
那我的结果里有些溶解曲线是可取的,这几条能用吗?
...

溶解曲线单一峰就可用。如果你不考虑扩增效率的话。

发自小木虫Android客户端
5楼2017-04-10 22:21:59
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