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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 急急急！求助关于QPCR的溶解曲线问题，大神看下我的结果能不能用 啊
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鑫风之记忆

铜虫 (初入文坛)

[求助] 急急急！求助关于QPCR的溶解曲线问题，大神看下我的结果能不能用 啊 已有6人参与

最近在做QPCR，大神看一下我的熔融曲线啊。
  我看网上好多人说，出峰时间小于80℃是引物二聚体，结果不能用，是这样的吗？我的结果出峰还好啊，大部分只有一个峰，这个结果能用吗？

急急急！求助关于QPCR的溶解曲线问题，大神看下我的结果能不能用 啊
QPCR溶解曲线.jpg
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风雨兼程，有你，就有希望
1楼 2015-07-22 11:04:16
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

linzshit

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-22 17:41:54
是不是引物二聚体你就看看你的阴性有没有熔解曲线峰就好了
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2楼2015-07-22 11:15:58
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biot

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把产物跑个胶看看是否是引物二聚体，和前天的引物的样品在一起跑一下，看看条带大小。如果条带大小正常，是应该是产物的，有的产物片段小或者GC含量低，溶解温度也会低一点。
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扬帆起航！
9楼2015-07-23 17:19:26
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圣诞小喵

新虫 (初入文坛)
请问楼主用的什么qPCRa仪器啊？是不是安捷伦mx3005p了？？
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3楼2015-07-22 13:03:31
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没有双峰啊，挺好的
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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
8楼2015-07-23 08:06:04
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
只看图的话是可以用的。
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10楼2015-07-24 15:41:58
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普通回帖

鑫风之记忆

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 圣诞小喵 at 2015-07-22 13:03:31
请问楼主用的什么qPCRa仪器啊？是不是安捷伦mx3005p了？？

是bio-rad CFX 384
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风雨兼程，有你，就有希望
4楼2015-07-22 14:53:07
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鑫风之记忆

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 圣诞小喵 at 2015-07-22 13:03:31
请问楼主用的什么qPCRa仪器啊？是不是安捷伦mx3005p了？？

是bio-rad CFX 384
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风雨兼程，有你，就有希望
5楼2015-07-22 14:53:27
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鑫风之记忆

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by linzshit at 2015-07-22 11:15:58
是不是引物二聚体你就看看你的阴性有没有熔解曲线峰就好了

您说的阴性是阴性对照吗，我没作阴性。试验做了四组不同处理，直接做的内参基因和目的基因。阴性是用DEPC水代替cDNA吗?求教
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风雨兼程，有你，就有希望
6楼2015-07-22 14:58:15
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andyzhengwp

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看图来说，结果是可以用的。引物二聚体是双峰的
赞一下 回复此楼
每天坚持一点点，终会成功！相信自己
7楼2015-07-22 17:57:03
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