24小时热门版块排行榜    

查看: 18278  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

急躁的小脾气

新虫 (初入文坛)

[求助] QPCR溶解曲线问题

求助大神。。。
开始我用普通PCR跑了这对引物,也跑了胶,结果还蛮好的,没有引物二聚体和非特异性,产物长度也是对的,283bp。
但是用QPCR做了之后,大多数溶解曲线出现双峰,还有的峰的位置都变了。
求大神赐教,我这种情况是样本被污染了吗?

QPCR溶解曲线问题
AC07F37566F8953944E91A807B6F2A8D.jpg@biostar2009
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

急躁的小脾气

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by idealgas at 2017-04-10 16:46:38
确切说qPCR条件跟普通pcr条件不一样,检测精度也不一样,经验告诉我用普通pcr检测q的不能说明什么问题。另外电泳的检测灵敏度也可能看不到非特异性扩增产生的条带,而
...

那我的结果里有些溶解曲线是可取的,这几条能用吗?

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-04-10 21:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

idealgas

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-12 22:13:11
确切说qPCR条件跟普通pcr条件不一样,检测精度也不一样,经验告诉我用普通pcr检测q的不能说明什么问题。另外电泳的检测灵敏度也可能看不到非特异性扩增产生的条带,而

发自小木虫Android客户端
2楼2017-04-10 16:46:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

深海看星

新虫 (初入文坛)

有的时候普通p跑出来的qpcr也不一定能跑出来。普通p只是大概看下引物特异性。

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-04-10 16:53:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

idealgas

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 急躁的小脾气 at 2017-04-10 21:51:40
那我的结果里有些溶解曲线是可取的,这几条能用吗?
...

溶解曲线单一峰就可用。如果你不考虑扩增效率的话。

发自小木虫Android客户端
5楼2017-04-10 22:21:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 16:25 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:12 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:00 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:57 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:45 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:00 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 12:35 by 40ms4Wlo4umh
[基金申请] 求教各位大神:2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀? +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 10:01 by 23jxep3nCNZb
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
[基金申请] 面上有专家说实验设备不是我们单位的 +6 zj_muchong 2026-09-08 8/400 2026-09-11 06:56 by suifengdao
[有机交流] 科研求助 10+4 我吃一只鱼 2026-09-07 4/200 2026-09-10 08:32 by 0940628
信息提示
请填处理意见