| 查看: 4472 | 回复: 21 | ||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||
新人求帮助新虫 (初入文坛)
|
[求助]
关于诱导表达问题 已有6人参与
|
|
|
重组菌诱导表达后跑蛋白电泳，结果如下图。从左到右依次为maker、重组菌上清、重组菌沉淀、空菌上清和沉淀 重组载体为bl-21-pet-28a，带his-tag，诱导温度为16度，时间16小时左右 用16度诱导是看别人说低温诱导有助于蛋白的正确折叠，可是我这怎么全是包涵体 希望有人能帮我解惑！！！！！！！！！！！！  H5`P@E1P4E2C}GL@ZV$%R%B.png |
回复此楼» 猜你喜欢
替拉扎明为缺氧选择性细胞毒药物研究提供新思路
已经有0人回复
-
拉坦前列腺素(Latanoprost)：前列腺素F2α衍生物如何成为青光眼一线用药
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有191人回复
-
卟啉家族中的明星分子：MESO-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉的性质与制备
已经有1人回复
-
宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复
-
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
-
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于大肠杆菌诱导表达
已经有13人回复
- 亲爱的们，遇到个棘手问题。关于大肠杆菌诱导表达蛋白问题。
已经有17人回复
- 关于构建pET28a载体转化后IPTG诱导跑SDS-PAGE胶问题。
已经有25人回复
- 求助各位关于IPTG诱导表达的一些问题
已经有5人回复
- 向大家请教一个问题，关于基因诱导表达的!
已经有5人回复
- 关于原核表达目的蛋白的问题
已经有8人回复
- 关于IPTG诱导蛋白表达的几个问题
已经有7人回复
- 关于蛋白质诱导和纯化的问题
已经有0人回复
- 关于诱导子处理时间梯度的问题
已经有0人回复
- 关于Rosetta(DE3)菌株用来做蛋白表达的相关问题。
已经有3人回复
- 请教诱导人类骨髓间充质干细胞向成骨方向分化的相关问题
已经有5人回复
- 请教关于酵母诱导蛋白表达的问题alpha-factor是什么东西？
已经有7人回复
- 关于原核表达his标签蛋白的纯化问题
已经有6人回复
- 关于原核表达问题
已经有12人回复
- 关于自诱导表达系统的问题
已经有2人回复
- 求助，关于诱导表达目的基因的问题
已经有10人回复
- 原核表达IPTG诱导后样品处理
已经有2人回复
- 关于表达的问题
已经有4人回复
- 关于诱导的问题
已经有2人回复
- 关于大肠表达纯化过程中的两个小问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】请教关于诱导表达产生包涵体问题
已经有3人回复
lialee22
木虫 (著名写手)
黑钻会员
- MolEPI: 1
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1949.6
- 散金: 316
- 红花: 33
- 沙发: 15
- 帖子: 2439
- 在线: 307.7小时
- 虫号: 2856932
- 注册: 2013-12-08
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: MolEPI+1 2017-02-18 01:08:57
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2017-02-18 01:09:10
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: MolEPI+1 2017-02-18 01:08:57
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2017-02-18 01:09:10
|
如果实验室通用的条件做出来效果好，那就用这个条件。 如果做不出来，那么，诱导表达的所有条件都需要自己去摸索。包括但不限于诱导温度、IPTG浓度、转速。 实验室中别人的IPTG浓度0.2mM做得很好，但对于你的菌来说可能还是太高了。 如果不做正交的话，还是挺简单的。 我当初一开始也是按照前人的条件做，别人就结果很好，可我就是包涵体。最后经过摸索后，我的诱导温度、IPTG浓度都比其他人的小很多。 总之就是让它表达慢一点。不过这样的话要求你目的酶活性要高，不然量太少，后面没法做。 祝福楼主顺利~~~~~~~ |
18楼2017-02-16 10:03:10
seascen2016
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 829.9
- 散金: 312
- 红花: 2
- 帖子: 183
- 在线: 40.3小时
- 虫号: 5492621
- 注册: 2017-01-17
- 专业: 生物化学
2楼2017-02-14 16:11:25
新人求帮助3楼2017-02-14 16:28:56
新人求帮助
新虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1123.8
- 散金: 510
- 帖子: 48
- 在线: 6.6小时
- 虫号: 4681652
- 注册: 2016-05-12
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2017-02-14 16:50:53
borrysa
金虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1688.2
- 散金: 210
- 红花: 7
- 帖子: 605
- 在线: 145.2小时
- 虫号: 2572703
- 注册: 2013-07-30
- 性别: MM
- 专业: 食品科学基础
10楼2017-02-15 02:44:35
寥落星晨
木虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 3455.6
- 散金: 56
- 红花: 1
- 帖子: 295
- 在线: 57.5小时
- 虫号: 2050036
- 注册: 2012-10-08
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
21楼2017-02-16 13:37:46
新人求帮助
新虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1123.8
- 散金: 510
- 帖子: 48
- 在线: 6.6小时
- 虫号: 4681652
- 注册: 2016-05-12
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2017-02-14 16:45:35
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17256.3
- 散金: 1672
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14557
- 在线: 2191.7小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
6楼2017-02-14 16:54:00
新人求帮助
新虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1123.8
- 散金: 510
- 帖子: 48
- 在线: 6.6小时
- 虫号: 4681652
- 注册: 2016-05-12
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
7楼2017-02-14 17:12:27
seascen2016
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 829.9
- 散金: 312
- 红花: 2
- 帖子: 183
- 在线: 40.3小时
- 虫号: 5492621
- 注册: 2017-01-17
- 专业: 生物化学
8楼2017-02-14 19:01:16
9楼2017-02-14 20:48:01
5