应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于原核表达目的蛋白的问题
91/1返回列表
查看: 1956  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

chicktrick

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于原核表达目的蛋白的问题 已有4人参与

各位虫友 小弟我现在做到蛋白原核表达这一步了 但是发现一个问题 在目的蛋白大小的区域 表达载体自身也有一个蛋白 请问往下怎么区分
另外 我的蛋白大小约为35kd 但是诱导之后发现在26kd出现了明显的差异 而35kd的差异并不明显 请问这可能是什么原因造成的
在下图中从左到右前八条甬道依次是iptg 0.2mmol 0.3mmol 0.4 -0.9mmol  第九条是iptg 0mmol 第十条是bl21 空白菌株 第十一条是marker  marker大小从上到下依次是 180 130 95 72 55 43 34 26 17 10

关于原核表达目的蛋白的问题
DSC_0018.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-12-19 13:56:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-19 18:34:45
你好，你的诱导条件是什么
赞一下 回复此楼
踏实
2楼2014-12-19 14:30:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chicktrick

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hajierlove at 2014-12-19 14:30:39
你好，你的诱导条件是什么

你好 iptg梯度 37度 180rpm
赞一下 回复此楼
3楼2014-12-19 14:48:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chicktrick

铁虫 (初入文坛)
各位大神们啊
回复此楼
4楼2014-12-20 12:05:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李增林

禁言 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-21 23:09:54
本帖内容被屏蔽
5楼2014-12-21 11:26:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

灰血动物

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-22 23:02:06
你好，我的建议是更换载体，另外诱导的条件还需要进一步摸索。

因为无法从图中明显看到哪个目的条带，建议可以从添加诱导剂的时间和培养温度入手。

祝君好远~
赞一下 回复此楼
未完成
6楼2014-12-22 14:09:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

灰血动物

金虫 (小有名气)
对不起 错别字了

是

祝君好运哈
赞一下 回复此楼
未完成
7楼2014-12-22 14:09:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鱼大喵

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

wesern blot验证一下不就可以了吗？要不换换载体试试
赞一下 回复此楼
8楼2014-12-22 16:59:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chicktrick

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 灰血动物 at 2014-12-22 14:09:01
你好，我的建议是更换载体，另外诱导的条件还需要进一步摸索。

因为无法从图中明显看到哪个目的条带，建议可以从添加诱导剂的时间和培养温度入手。

祝君好远~

谢谢你 我决定先提取可溶蛋白做一个western blot试试
赞一下 回复此楼
9楼2014-12-25 22:37:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chicktrick 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 伯胺上甲基求助 100+3 002tmumu 2026-07-14 3/150 2026-07-15 20:37 by 盛世杂家
[基金申请] 小木虫没落了，除了祈祷帖子，几乎看不到有价值的帖子 +13 botar 2026-07-14 14/700 2026-07-15 19:28 by 寒流32
[基金申请] 会评 +5 无名者登山 2026-07-15 5/250 2026-07-15 18:15 by 杠就是你对
[基金申请] 生生命学部会评 +3 wuke100666 2026-07-15 3/150 2026-07-15 17:11 by kingkocxr
[基金申请] E口会评 +11 布布和一二 2026-07-13 13/650 2026-07-15 16:34 by Kittylucky
[基金申请] E口青C会评结束了吗？ 40+3 小小书虫c 2026-07-14 9/450 2026-07-15 16:04 by 安静的知了
[基金申请] 生命口C13面上会评时间 +6 luckinging 2026-07-14 9/450 2026-07-15 14:39 by 雨冰共舞
[教师之家] 内心匮乏 +13 水冰月月野兔 2026-07-12 13/650 2026-07-15 14:21 by jiduquegai
[文学芳草园] 你可曾有过这种感受？ +3 Jeanya 2026-07-09 6/300 2026-07-15 11:07 by mbtwt
[论文投稿] 农业机械学报投稿周期 +3 G0DLIN 2026-07-14 7/350 2026-07-15 09:26 by xs74101122
[基金申请] 国自然面上D口祈祷 +4 monkeynana 2026-07-14 4/200 2026-07-15 09:14 by 白水煮
[论文投稿] 跨出版社商投稿 20+4 倪好520 2026-07-13 4/200 2026-07-15 08:35 by bobvan
[基金申请] 没收到消息，再次陪跑 +3 天空星辰fly 2026-07-14 3/150 2026-07-14 19:14 by 6543yes
[基金申请] 不要再数国自然申请书的 filecode 的分隔符个数了 +13 sadpencil 2026-07-12 20/1000 2026-07-14 13:12 by 杠就是你对
[论文投稿] MSER送审了还被拒稿 +4 S778950906 2026-07-08 6/300 2026-07-13 16:22 by tfang
[基金申请] 祈祷青基必中 50+6 hadengry 2026-07-09 16/800 2026-07-12 20:31 by 登山虫虫
[考博] 27届辽宁大学应届毕业生申博 +3 可乐微风大海 2026-07-09 3/150 2026-07-10 21:23 by 贪玩的研究僧
[基金申请] 关于如何从代码看上不上会 +17 且听虎啸 2026-07-09 23/1150 2026-07-10 19:51 by sdfapple719
[有机交流] chemdraw 20+5 ?慕鱼? 2026-07-08 6/300 2026-07-10 15:37 by 紫枫星域
[考研] 在职考研 +6 wu5d 2026-07-08 7/350 2026-07-09 16:40 by 化工小霸王呀
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭