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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 膜蛋白为什么在原核中难以表达，从理论上解释。。。多谢。。
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匿名

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1楼 2014-08-05 12:08:24
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xissy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+1, 鼓励应助 2014-08-06 15:34:55
zq191236086: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-08-12 11:07:47
首先要知道什么叫做膜蛋白。膜蛋白时能够与细胞质膜或细胞器膜相结合的蛋白质。在真核细胞内，膜蛋白首先整合在ER膜，然后被高尔基体的转运系统转运到细胞膜。由于缺少上述细胞器，原核细胞的膜蛋白在核糖体的帮助下，直接定位于细胞质膜上。这样说，你理解了吧？膜蛋白表达时如果都定位在宿主膜上，对宿主本身是有毒害的。有个C41或C43 DE3表达载体，文献表达是可以适宜表达这种毒蛋白的。
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2楼2014-08-06 11:18:49
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
膜蛋白有跨膜区的，要分段表达

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-08-06 20:15:58
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zq191236086: 金币+5, ★★★很有帮助, 很感谢您的分析 2014-08-12 11:11:42
个人理解：首先，膜蛋白大部分具有跨膜结构域，存在疏水性重复序列。但是这种蛋白在原核载体中表达多呈现为不溶性包涵体，疏水性多肽会抑制翻译过程，甚至与原核膜结构融合形成毒性；其次，膜蛋白一般都是由多条肽段表达后由经高尔基体剪切加工后被膜结构转运至细胞膜，并通过蛋白拓扑异构酶等作用形成多次跨膜结构，所以在原核表达时往往需要了解蛋白质的整个剪切加工过程，某些蛋白区域可能是添加或修饰后才具有功能的。顾在建立表达模板时很难组合起来，如果分段表达又无法形成活性。（矛盾）。
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4楼2014-08-11 15:40:13
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