24小时热门版块排行榜    

查看: 2748  |  回复: 13

sunbeartao

新虫 (小有名气)

[求助] 膜蛋白在大肠中表达是否还是膜蛋白?

小虫马上开始做膜蛋白表达了,有些概念不太清楚,不敢下手。
打算在PET中表达膜蛋白(山梨醇脱氢酶),诉诸BL21 ,
表达出来还是在大肠膜上吗?怎么纯化?怎么跑蛋白胶?有步骤或试剂盒吗?请大侠系统的指点下,金币不多,望莫怪!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

生物小通

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 有时候要看运气啊 2013-07-06 09:13:43
我做的也是膜蛋白,真核中定位高尔基体和细胞膜,原核中有可溶性表达,至于定位不清楚。纯化也没太大问题。这个东西看自己吧,在我们这里很多老实说不太可能成功的被许多新手就做成功了,相信自己。
学习,进步
8楼2013-07-04 23:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

bleach060452

新虫 (小有名气)

传说中的膜蛋白啊,祝好运吧
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-07-04 15:57:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-04 15:57:18
传说中的膜蛋白啊,祝好运吧

...兄弟不要这样,搞得好紧张
22
3楼2013-07-04 20:58:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hym0411

木虫 (正式写手)


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-04 22:24:26
这的看您插入的膜蛋白的序列是在哪里了?如果是连接到大肠杆菌的膜蛋白序列后,那应该就是了。如果查到其它序列中,那就不知道了。
生而无涯
4楼2013-07-04 21:35:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hym0411 at 2013-07-04 21:35:54
这的看您插入的膜蛋白的序列是在哪里了?如果是连接到大肠杆菌的膜蛋白序列后,那应该就是了。如果查到其它序列中,那就不知道了。

在质粒中表达
22
5楼2013-07-04 22:40:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是形成包涵体,为什么在原核中表达?
6楼2013-07-04 22:43:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by panda73 at 2013-07-04 22:43:00
应该是形成包涵体,为什么在原核中表达?

啊?为什么形成包涵体?师兄说可以从膜上洗下来的。
之所以选择大肠是野生菌也是原核的,而且之后要做代谢改造,所以大肠比较有优势的
22
7楼2013-07-04 22:56:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 生物小通 at 2013-07-04 23:19:07
我做的也是膜蛋白,真核中定位高尔基体和细胞膜,原核中有可溶性表达,至于定位不清楚。纯化也没太大问题。这个东西看自己吧,在我们这里很多老实说不太可能成功的被许多新手就做成功了,相信自己。

嗯,多谢鼓励
22
9楼2013-07-05 07:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

?
10楼2013-07-06 08:50:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunbeartao 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 3/150 2026-08-07 21:49 by shalamu
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +8 且听虎啸 2026-08-07 11/550 2026-08-07 21:32 by 淞淞向上
[基金申请] 基金中了 +13 laoda193707 2026-08-06 13/650 2026-08-07 20:33 by tchen18
[基金申请] 关于filecode +3 布布和一二 2026-08-07 6/300 2026-08-07 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
信息提示
请填处理意见