24小时热门版块排行榜    

查看: 2831  |  回复: 13

sunbeartao

新虫 (小有名气)

[求助] 膜蛋白在大肠中表达是否还是膜蛋白?

小虫马上开始做膜蛋白表达了,有些概念不太清楚,不敢下手。
打算在PET中表达膜蛋白(山梨醇脱氢酶),诉诸BL21 ,
表达出来还是在大肠膜上吗?怎么纯化?怎么跑蛋白胶?有步骤或试剂盒吗?请大侠系统的指点下,金币不多,望莫怪!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

生物小通

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 有时候要看运气啊 2013-07-06 09:13:43
我做的也是膜蛋白,真核中定位高尔基体和细胞膜,原核中有可溶性表达,至于定位不清楚。纯化也没太大问题。这个东西看自己吧,在我们这里很多老实说不太可能成功的被许多新手就做成功了,相信自己。
学习,进步
8楼2013-07-04 23:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

bleach060452

新虫 (小有名气)

传说中的膜蛋白啊,祝好运吧
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-07-04 15:57:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-04 15:57:18
传说中的膜蛋白啊,祝好运吧

...兄弟不要这样,搞得好紧张
22
3楼2013-07-04 20:58:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hym0411

木虫 (正式写手)


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-04 22:24:26
这的看您插入的膜蛋白的序列是在哪里了?如果是连接到大肠杆菌的膜蛋白序列后,那应该就是了。如果查到其它序列中,那就不知道了。
生而无涯
4楼2013-07-04 21:35:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hym0411 at 2013-07-04 21:35:54
这的看您插入的膜蛋白的序列是在哪里了?如果是连接到大肠杆菌的膜蛋白序列后,那应该就是了。如果查到其它序列中,那就不知道了。

在质粒中表达
22
5楼2013-07-04 22:40:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是形成包涵体,为什么在原核中表达?
6楼2013-07-04 22:43:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by panda73 at 2013-07-04 22:43:00
应该是形成包涵体,为什么在原核中表达?

啊?为什么形成包涵体?师兄说可以从膜上洗下来的。
之所以选择大肠是野生菌也是原核的,而且之后要做代谢改造,所以大肠比较有优势的
22
7楼2013-07-04 22:56:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 生物小通 at 2013-07-04 23:19:07
我做的也是膜蛋白,真核中定位高尔基体和细胞膜,原核中有可溶性表达,至于定位不清楚。纯化也没太大问题。这个东西看自己吧,在我们这里很多老实说不太可能成功的被许多新手就做成功了,相信自己。

嗯,多谢鼓励
22
9楼2013-07-05 07:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunbeartao

新虫 (小有名气)

?
10楼2013-07-06 08:50:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunbeartao 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:41 by eObJPa4gWmp6
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 4/200 2026-09-06 18:09 by eObJPa4gWmp6
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:09 by eObJPa4gWmp6
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:01 by eObJPa4gWmp6
[文学芳草园] 两块石头 +7 阿美_Lml888 2026-09-03 9/450 2026-09-06 17:48 by myrtle
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 17:21 by eObJPa4gWmp6
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 9/450 2026-09-06 17:09 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 8/400 2026-09-06 17:09 by eObJPa4gWmp6
[博后之家] 广西大学-广州大学招聘博士后 欢迎广大优秀人才!!! +5 SCSIOyxguo 2026-09-03 8/400 2026-09-06 15:06 by 可爱小花朵
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 3/150 2026-09-06 13:09 by eObJPa4gWmp6
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +10 瞬息宇宙 2026-09-01 19/950 2026-09-06 11:15 by jiangxuan2004
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 8/400 2026-09-06 11:00 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 4/200 2026-09-06 07:20 by E1iiBLMU2XnD
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 CRJ0Aq2FtVH0 2026-09-03 15/750 2026-09-06 05:48 by E1iiBLMU2XnD
[文学芳草园] 初秋的晨风 +4 阿美_Lml888 2026-09-04 6/300 2026-09-05 13:51 by 阿美_Lml888
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +6 瞬息宇宙 2026-08-31 9/450 2026-09-05 13:11 by haizai99
[硕博家园] Ei源刊怎么投 +4 Fengshun9711 2026-09-04 4/200 2026-09-04 19:30 by 研途知予
[硕博家园] 哈尔滨工业大学韩晓军教授课题组招收2027年硕士推免生及博士研究生 +3 灯灯灯灯DDDD 2026-09-03 3/150 2026-09-03 21:22 by 科研皮皮猪
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
信息提示
请填处理意见