24小时热门版块排行榜    

查看: 2792  |  回复: 13

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在大肠杆菌中表达的蛋白质也不一定都形成包涵体。

包涵体形成的原因:
1.在重组蛋白质的表达过程中缺乏某些蛋白质折叠所需要的帮助因子,因而无法形成正确的次级键。
2.外源基因合成速度太快,没有时间进行进行折叠,二硫键不能正确地配对,过多的蛋白质间的非特异性结合,蛋白质无法达到足够的溶解度。
3.重组蛋白质的一级结构也与包涵体的形成有关,一般说含Cys和Met越多的蛋白质越容易形成包涵体;Pro含量明显与包涵体的形成呈现正相关,可能是因为Pro和Hypro破坏alpha-helix,而alpha-helix有一定机械硬度,可以足额蛋白质分子彼此靠近。
5.重组蛋白质在细胞内的环境不适,在发酵温度高和细胞内的pH值接近该蛋白质等电点时容易形包涵体。

在大肠杆菌中表达的膜蛋白如果不满足以上条件,也不会形成包涵体,而且由于其有细胞膜等位序列,应该可以定位到大肠杆菌的细胞膜上。
11楼2013-07-06 14:38:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

大肠杆菌的细胞膜也有部分真核细胞的内质网和线粒体的功能。
12楼2013-07-06 14:40:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aoda123

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我做的膜蛋白在BL21中没有表达,而且表达很不稳定
身体健康,工作顺利
13楼2013-07-30 09:45:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ginnyzhuzhu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 生物小通 at 2013-07-04 23:19:07
我做的也是膜蛋白,真核中定位高尔基体和细胞膜,原核中有可溶性表达,至于定位不清楚。纯化也没太大问题。这个东西看自己吧,在我们这里很多老实说不太可能成功的被许多新手就做成功了,相信自己。

求指导!!!我也在做,但是木有成功啊
14楼2014-05-09 15:38:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunbeartao 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 17:09 by winsaint
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +11 Kittylucky 2026-08-27 12/600 2026-08-28 16:26 by lyxiaomc
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见