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[求助] 关于诱导表达问题已有6人参与

重组菌诱导表达后跑蛋白电泳，结果如下图。从左到右依次为maker、重组菌上清、重组菌沉淀、空菌上清和沉淀
重组载体为bl-21-pet-28a，带his-tag，诱导温度为16度，时间16小时左右
用16度诱导是看别人说低温诱导有助于蛋白的正确折叠，可是我这怎么全是包涵体
希望有人能帮我解惑！！！！！！！！！！！！

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1楼 2017-02-14 13:10:05

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 栾栾silence at 2017-02-14 16:28:56
并不是所有的原核表达蛋白都会分泌表达的，有的就是会形成包涵体，看到你的上清中其实也含有一点目的蛋白，你可以将菌体多超声，多裂解，使其充分裂解，然后只要上清中的目的蛋白，也可以就这样按照包涵体蛋白的提取 ...

超声时间过长不是会使蛋白变性吗？这样不会影响酶活性的测定吗