24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2152  |  回复: 5
本帖产生 1 个 BM-EPI ,点击这里进行查看

crossgate2

金虫 (小有名气)

[求助] 请教诱导人类骨髓间充质干细胞向成骨方向分化的相关问题

小弟最近准备开展关于“蛋白质诱导人类骨髓间充质细胞成骨分化”的研究。之前养的一直是MC3T3-E1预成骨细胞,现在换了一种细胞,有一些问题希望能向大家请教请教。
      
        1、研究蛋白质诱导人类骨髓间充质干细胞的成骨分化,最好采用第几代的hBMCs呢?为什么呢?
        2、用CCK-8表征蛋白质对于hBMCs的增殖作用,培养基是否需要加成骨诱导成分(β-甘油磷酸钠、抗坏血酸)?
        3、测ALP活性,时间节点/培养板/细胞接种数目 应该如何选取呢?准备分别选取5、10、15、20天/48孔板/1万个细胞每孔  是否合适?
        4、关于茜素红染色,时间节点选择7/14/21天是否合适?
        5、关于RT-PCR,想外包给公司测一下runx-2、OCN(骨钙蛋白)、COL-I(I型胶原)、OPN(骨桥蛋白)表达,时间节点如何选取比较好呢?还有没有其他需要注意的事项(细胞密度/培养板选取  等等)?
        6、能否推荐一些关于干细胞的成骨分化的免疫荧光染色或者是一些其他的表征手段呢?

        目前主要想到这些问题,希望能够得到一些指点。
        另外,祝大家天天有数据,月月有文章!!

[ Last edited by crossgate2 on 2013-6-28 at 21:55 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

MC3T3

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

r123ed

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
crossgate2: 金币+30, ★★★★★最佳答案 2013-07-14 22:58:59
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-07-15 21:55:52
markar: 金币+1, BM-EPI+1, 感谢回帖交流! 2013-07-15 22:08:07
1、研究蛋白质诱导人类骨髓间充质干细胞的成骨分化,最好采用第几代的hBMCs呢?为什么呢?
当然是原代了,可塑性强,传代的培养过程干细胞不一定往成骨方向跑,可能往成纤维跑了4,5代了,你再去往成骨跑,不是南辕北辙了。
        2、用CCK-8表征蛋白质对于hBMCs的增殖作用,培养基是否需要加成骨诱导成分(β-甘油磷酸钠、抗坏血酸)?
增殖跟分化两个概念,你要是诱导成骨,就加,不诱导,不加。
        3、测ALP活性,时间节点/培养板/细胞接种数目 应该如何选取呢?准备分别选取5、10、15、20天/48孔板/1万个细胞每孔  是否合适?
ALP试剂盒上有相应的说明,从你说的,应该是合适的。
        4、关于茜素红染色,时间节点选择7/14/21天是否合适?
没问题,前提是你加了诱导剂
        5、关于RT-PCR,想外包给公司测一下runx-2、OCN(骨钙蛋白)、COL-I(I型胶原)、OPN(骨桥蛋白)表达,时间节点如何选取比较好呢?还有没有其他需要注意的事项(细胞密度/培养板选取  等等)?
这都取决于你的实验咯,提醒你一点,基因表达在蛋白表达之前,后续是否测蛋白?其他的注意事项,就是给外包公司搞搞价钱吧,这里水很深的。
        6、能否推荐一些关于干细胞的成骨分化的免疫荧光染色或者是一些其他的表征手段呢?
茜素红就够了吧,免疫荧光要染什么啊,当然最直观的当然是动物体内实验啦,一上动物,你就会发现连BMP2什么的都不一定好使。
shape memory
5楼2013-07-13 20:40:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

crossgate2

金虫 (小有名气)

期待回复
2楼2013-07-04 18:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxyan

新虫 (小有名气)

问题好专业啊,bless~~
3楼2013-07-05 08:00:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crossgate2

金虫 (小有名气)

期待大神回复
4楼2013-07-12 16:54:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyaijj121

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

6楼2017-06-12 19:49:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 crossgate2 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工301分求调剂院校 +9 刺痛jk 2026-04-06 10/500 2026-04-06 08:12 by melodiousnow
[考研] 071000生物学调剂 +3 拉提桃 2026-04-06 3/150 2026-04-06 05:41 by 天道酬勤girl
[考研] 301求调剂 +5 细胞相关蛋白 2026-04-02 9/450 2026-04-05 20:14 by lys0704
[考研] 322求调剂 +3 嗯哼哼恒 2026-04-05 3/150 2026-04-05 19:52 by nepu_uu
[考研] 材料0856 英一数二 323 求调剂 +14 袁sy 2026-04-01 14/700 2026-04-05 18:18 by cql1109
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +13 洛神哥哥 2026-04-03 13/650 2026-04-05 17:27 by zzx2138
[考研] 270分求调剂 +4 maxjxbsk 2026-04-01 4/200 2026-04-05 17:04 by yulian1987
[考研] 346分的生物与医药08600求调剂 +5 常雨阳上岸 2026-04-05 6/300 2026-04-05 13:42 by imissbao
[考研] 一志愿郑大0705求调剂 +3 橘十一 2026-04-02 4/200 2026-04-05 00:05 by chongya
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 材料与化工306分找调剂 +23 沧海轻舟e 2026-04-02 27/1350 2026-04-04 21:52 by laoshidan
[考研] 材料295 +13 小英11 2026-04-03 14/700 2026-04-04 09:02 by 来看流星雨10
[考研] 282求调剂 +20 ycy1201 2026-04-01 22/1100 2026-04-04 00:42 by userper
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
[考研] 工科 267求调剂 +5 wanwan00 2026-04-02 7/350 2026-04-03 14:14 by zhangdingwa
[考研] 0856材料与化工调剂,339 +14 10213207 2026-03-31 14/700 2026-04-02 21:01 by 1104338198
[考研] 085602化工求调剂(331分) +9 111@127 2026-03-30 9/450 2026-04-02 20:00 by dick_runner
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-04-02 3/150 2026-04-02 15:06 by cal0306
[考研] 一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕,331分求调剂 +5 蒋昌鹏qtj 2026-04-01 5/250 2026-04-02 08:10 by fxue1114
[考研] 0855机械初试280求调剂 +3 kazenotori 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:08 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见