应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 请教诱导人类骨髓间充质干细胞向成骨方向分化的相关问题
51/1返回列表
查看: 2444  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BM-EPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

crossgate2

金虫 (小有名气)

[求助] 请教诱导人类骨髓间充质干细胞向成骨方向分化的相关问题

小弟最近准备开展关于“蛋白质诱导人类骨髓间充质细胞成骨分化”的研究。之前养的一直是MC3T3-E1预成骨细胞，现在换了一种细胞，有一些问题希望能向大家请教请教。
      
        1、研究蛋白质诱导人类骨髓间充质干细胞的成骨分化，最好采用第几代的hBMCs呢？为什么呢？
        2、用CCK-8表征蛋白质对于hBMCs的增殖作用，培养基是否需要加成骨诱导成分（β-甘油磷酸钠、抗坏血酸）？
        3、测ALP活性，时间节点/培养板/细胞接种数目 应该如何选取呢？准备分别选取5、10、15、20天/48孔板/1万个细胞每孔  是否合适？
        4、关于茜素红染色，时间节点选择7/14/21天是否合适？
        5、关于RT-PCR，想外包给公司测一下runx-2、OCN（骨钙蛋白）、COL-I（I型胶原）、OPN（骨桥蛋白）表达，时间节点如何选取比较好呢？还有没有其他需要注意的事项（细胞密度/培养板选取  等等）？
        6、能否推荐一些关于干细胞的成骨分化的免疫荧光染色或者是一些其他的表征手段呢？

        目前主要想到这些问题，希望能够得到一些指点。
        另外，祝大家天天有数据，月月有文章！！

[ Last edited by crossgate2 on 2013-6-28 at 21:55 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

MC3T3

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-28 16:22:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxyan

新虫 (小有名气)
问题好专业啊，bless~~
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-07-05 08:00:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

r123ed

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
crossgate2: 金币+30, ★★★★★最佳答案 2013-07-14 22:58:59
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-07-15 21:55:52
markar: 金币+1, BM-EPI+1, 感谢回帖交流！ 2013-07-15 22:08:07
1、研究蛋白质诱导人类骨髓间充质干细胞的成骨分化，最好采用第几代的hBMCs呢？为什么呢？
当然是原代了，可塑性强，传代的培养过程干细胞不一定往成骨方向跑，可能往成纤维跑了4,5代了，你再去往成骨跑，不是南辕北辙了。
        2、用CCK-8表征蛋白质对于hBMCs的增殖作用，培养基是否需要加成骨诱导成分（β-甘油磷酸钠、抗坏血酸）？
增殖跟分化两个概念，你要是诱导成骨，就加，不诱导，不加。
        3、测ALP活性，时间节点/培养板/细胞接种数目 应该如何选取呢？准备分别选取5、10、15、20天/48孔板/1万个细胞每孔  是否合适？
ALP试剂盒上有相应的说明，从你说的，应该是合适的。
        4、关于茜素红染色，时间节点选择7/14/21天是否合适？
没问题，前提是你加了诱导剂
        5、关于RT-PCR，想外包给公司测一下runx-2、OCN（骨钙蛋白）、COL-I（I型胶原）、OPN（骨桥蛋白）表达，时间节点如何选取比较好呢？还有没有其他需要注意的事项（细胞密度/培养板选取  等等）？
这都取决于你的实验咯，提醒你一点，基因表达在蛋白表达之前，后续是否测蛋白？其他的注意事项，就是给外包公司搞搞价钱吧，这里水很深的。
        6、能否推荐一些关于干细胞的成骨分化的免疫荧光染色或者是一些其他的表征手段呢？
茜素红就够了吧，免疫荧光要染什么啊，当然最直观的当然是动物体内实验啦，一上动物，你就会发现连BMP2什么的都不一定好使。
赞一下(9人) 回复此楼
shape memory
5楼2013-07-13 20:40:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyaijj121

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
6楼2017-06-12 19:49:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 3/150 2026-09-17 16:03 by 0ngsZVSCTS7z
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 13:39 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 yaCh4X3wd045 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:38 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:16 by k06BKNblrGRH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 5/250 2026-09-17 05:14 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-17 04:16 by k06BKNblrGRH
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-17 03:14 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:28 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-17 01:16 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-16 03:14 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:14 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭