| 查看: 3179 | 回复: 13 | |||
[求助]
关于大肠杆菌诱导表达 已有2人参与
|
|||
|
用的是pet29b，我的蛋白37度3h诱导后全部是包涵体，很明显，上清基本无。然后22度诱导11h后沉淀中没有目的蛋白，上清中少，但比之前要多。这是不是说明，我应该在37度和22度之间摸条件呢？还有我听说低iptg有助于降低包涵体，但是为何我觉得1mM的好像比0.1mM和0.02mM的好像上清中要多一点呢 还有就是，如果大体积诱导，多少升细菌液合适呢？ 问题比较多，谢谢各位啦  |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生物知识 |
» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急
已经有7人回复
-
售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急
已经有11人回复
-
为什么中国大学工科教授们水了那么多所谓的顶会顶刊，但还是做不出宇树机器人？
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 亲爱的们，遇到个棘手问题。关于大肠杆菌诱导表达蛋白问题。
已经有17人回复
- 急！求助有关大肠杆菌阿拉伯糖启动子表达的经验以及文章。
已经有4人回复
- 关于重组菌诱导表达
已经有4人回复
- 关于测蛋白各项参数的问题
已经有2人回复
- 关于带卡那抗性的重组大肠杆菌
已经有3人回复
- 关于诱导酶的分子量的确定
已经有1人回复
- 急求 多谢 关于大肠杆菌菌体总蛋白的提取
已经有5人回复
- 关于质粒提取
已经有7人回复
- 【求助/交流】请教关于大肠杆菌lamda RED重组问题
已经有23人回复
|
结果出来了，我给自己回个贴吧，试了26度和30度诱导，也没有包含体了，对比后发现还是22度低温诱导上清中比较多，于是大体积诱导时做了20度0.5mM诱导了16h，虽然不多，但结果还算满意，这样终于可以回家好好过年喽～～感谢大家了，以及努力了那么久的自己 发自小木虫IOS客户端 |
10楼2016-01-25 15:24:22
4楼2016-01-20 09:50:43
a2703521
金虫 (小有名气)
123
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 1100.4
- 红花: 2
- 帖子: 207
- 在线: 53小时
- 虫号: 3134792
- 注册: 2014-04-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2016-01-20 16:43:53
a2703521
金虫 (小有名气)
123
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 1100.4
- 红花: 2
- 帖子: 207
- 在线: 53小时
- 虫号: 3134792
- 注册: 2014-04-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
8楼2016-01-22 12:04:15
a2703521
金虫 (小有名气)
123
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 1100.4
- 红花: 2
- 帖子: 207
- 在线: 53小时
- 虫号: 3134792
- 注册: 2014-04-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2016-01-22 12:05:35
2楼2016-01-19 17:59:06
3楼2016-01-20 08:41:54
送红花一朵 |
我又做了26度30度过夜的，比较看，觉得22度0.5mM好像多一点，我打算用20度大体积诱导纯化，做完就可以回家啦，所以这一次挺重要的，你说的过夜是多少小时呢？如果我20度诱导的话，你觉得诱导剂浓度0.5合适不？时间14—16h？多谢啦 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2016-01-21 14:28:22
7楼2016-01-21 14:35:38
