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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 关于诱导酶的分子量的确定
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jessica_nn

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于诱导酶的分子量的确定

现在在做一个微生物诱导酶的大肠杆菌工程菌的表达纯化，查阅文献发现天然发酵时此诱导酶的分子量约为40KDa左右（SDS-PAGE检测，下同），而大肠杆菌工程菌诱导表达时分子量大约为67KDa左右，且大部分在包涵体里。我现在诱导出来的蛋白跑SDS-PAGE在66KDa处有明显条带，可以说明诱导成功吗？还有，有什么方法可以确定此酶是以什么形式（单体或寡聚体）存在的吗？希望大家帮帮忙~
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1楼 2012-11-18 22:10:29
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鱼山听涛

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有的蛋白质会在分泌后发生进一步剪切的。因为你的重组蛋白没有分泌出来，所以可能没有正确切割。从分子量来看，只能是单体。建议你减缓诱导过程，这样可能会更多地分泌，从而得到相应分子量的成熟蛋白。
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书到用时方恨少
2楼2012-11-20 12:40:24
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