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关于大肠杆菌诱导表达 已有2人参与
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用的是pet29b，我的蛋白37度3h诱导后全部是包涵体，很明显，上清基本无。然后22度诱导11h后沉淀中没有目的蛋白，上清中少，但比之前要多。这是不是说明，我应该在37度和22度之间摸条件呢？还有我听说低iptg有助于降低包涵体，但是为何我觉得1mM的好像比0.1mM和0.02mM的好像上清中要多一点呢 还有就是，如果大体积诱导，多少升细菌液合适呢？ 问题比较多，谢谢各位啦  |
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多谢啦，结果出来了，20度，0.4mM诱导剂16h，过柱后用了8ml洗脱液，第二天本来打算处理柱子，又加了5ml洗脱液，发现还有目的蛋白，浓度都不多，有些弱杂带，不过对我来说也算不错啦，开学再做时就用洗脱液多孵育时间，之前时间5min太短。谢谢你啦 发自小木虫IOS客户端 |
11楼2016-01-25 15:36:53
2楼2016-01-19 17:59:06
3楼2016-01-20 08:41:54
4楼2016-01-20 09:50:43