24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3223  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

梦的金色城堡

新虫 (小有名气)

[求助] 关于大肠杆菌诱导表达 已有2人参与

用的是pet29b,我的蛋白37度3h诱导后全部是包涵体,很明显,上清基本无。然后22度诱导11h后沉淀中没有目的蛋白,上清中少,但比之前要多。这是不是说明,我应该在37度和22度之间摸条件呢?还有我听说低iptg有助于降低包涵体,但是为何我觉得1mM的好像比0.1mM和0.02mM的好像上清中要多一点呢
还有就是,如果大体积诱导,多少升细菌液合适呢?
问题比较多,谢谢各位啦
回复此楼
生物-医药
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦的金色城堡

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by a2703521 at 2016-01-20 16:43:53
22℃诱导11h时间有点短了,最好过夜,15h以上应该可以。诱导剂用量最好别太多,不然容易出现包涵体,根据情况可以适当调整一下。

哦哦,刚注意你说的时间。再请问一下,his标签的,过柱的话,像我这种上清中蛋白少的,洗脱液15ml会不会出来的蛋白浓度就小,需要减少洗脱液的量吗

发自小木虫IOS客户端
生物-医药
7楼2016-01-21 14:35:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

梦的金色城堡

新虫 (小有名气)

怎么没人理我吗?
生物-医药
2楼2016-01-19 17:59:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eleep

新虫 (初入文坛)

听意思是为了上清蛋白多?我们都是要沉淀啊,听不懂

发自小木虫Android客户端
3楼2016-01-20 08:41:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦的金色城堡

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by eleep at 2016-01-20 08:41:54
听意思是为了上清蛋白多?我们都是要沉淀啊,听不懂

哦哦,要沉淀的话需要复性吧,我们是要上清

发自小木虫IOS客户端
生物-医药
4楼2016-01-20 09:50:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 292求调剂 +13 是妍子也是研子 2026-03-30 13/650 2026-03-30 18:01 by 小徐0109
[考研] 材料化工340求调剂 +3 jhx777 2026-03-30 3/150 2026-03-30 17:54 by JourneyLucky
[考研] 282求调剂 +4 wcq131415 2026-03-24 4/200 2026-03-30 10:39 by Delta2012
[考研] 085600,专业课化工原理,320分求调剂 +4 大馋小子 2026-03-29 4/200 2026-03-29 23:12 by Evan_Liu
[考研] 求调剂 +4 QiMing7 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:10 by 唐沐儿
[考研] 调剂310 +12 温柔的晚安 2026-03-25 13/650 2026-03-29 20:01 by 无际的草原
[考研] 299求调剂 +10 15188958825 2026-03-25 10/500 2026-03-29 17:51 by 王亮_大连医科大
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 调剂考研 +3 王杰一 2026-03-29 3/150 2026-03-29 08:09 by fmesaito
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 复试调剂 +3 raojunqi0129 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:27 by 落睿可思
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分,前三科223分 +5 dongfang59 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:53 by wxiongid
[考研] 085701环境工程求调剂 +9 多久上课 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:58 by fmesaito
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
信息提示
请填处理意见