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梦的金色城堡

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by a2703521 at 2016-01-22 12:04:15
20℃诱导,过夜一般超过15h就可以了,如果蛋白稳定性好的话可以适当延长时间,不过最好不要超过20h,不然很容易溶菌,而且氨苄抗性的菌种超过20h还容易长杂菌,会影响蛋白的质量和产量。0.5的诱导剂用量差不多了, ...

多谢啦,结果出来了,20度,0.4mM诱导剂16h,过柱后用了8ml洗脱液,第二天本来打算处理柱子,又加了5ml洗脱液,发现还有目的蛋白,浓度都不多,有些弱杂带,不过对我来说也算不错啦,开学再做时就用洗脱液多孵育时间,之前时间5min太短。谢谢你啦

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生物-医药
11楼2016-01-25 15:36:53
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a2703521

金虫 (小有名气)

123

引用回帖:
11楼: Originally posted by 梦的金色城堡 at 2016-01-25 15:36:53
多谢啦,结果出来了,20度,0.4mM诱导剂16h,过柱后用了8ml洗脱液,第二天本来打算处理柱子,又加了5ml洗脱液,发现还有目的蛋白,浓度都不多,有些弱杂带,不过对我来说也算不错啦,开学再做时就用洗脱液多孵育时 ...

不用客气,以后多交流交流,互相学习!
12楼2016-01-26 15:02:34
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暖阳123456

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 梦的金色城堡 at 2016-01-25 15:24:22
结果出来了,我给自己回个贴吧,试了26度和30度诱导,也没有包含体了,对比后发现还是22度低温诱导上清中比较多,于是大体积诱导时做了20度0.5mM诱导了16h,虽然不多,但结果还算满意,这样终于可以回家好好过年喽~ ...

你好,我想请问一下,37度出现包涵体,降低温度就会减少吗?iptg浓度用多少比较合适?表达蛋白酶的话,是需要信号肽还是不需要,我看到一篇文献说是无信号肽表达了,有信号肽并没有表达。

发自小木虫Android客户端
13楼2016-04-11 22:53:05
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-字仲康

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

14楼2016-05-21 14:06:00
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