24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

梦的金色城堡

新虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 145.1
散金: 5
红花: 1
帖子: 76
在线: 24.3小时
虫号: 3720846
注册: 2015-03-09
性别: MM
专业: 免疫生物学

[求助] 关于大肠杆菌诱导表达已有2人参与

用的是pet29b，我的蛋白37度3h诱导后全部是包涵体，很明显，上清基本无。然后22度诱导11h后沉淀中没有目的蛋白，上清中少，但比之前要多。这是不是说明，我应该在37度和22度之间摸条件呢？还有我听说低iptg有助于降低包涵体，但是为何我觉得1mM的好像比0.1mM和0.02mM的好像上清中要多一点呢
还有就是，如果大体积诱导，多少升细菌液合适呢？
问题比较多，谢谢各位啦

回复此楼

» 猜你喜欢

投稿精细化工已经有6人回复
博士读完未来一定会好吗已经有36人回复
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？已经有10人回复
导师想让我从独立一作变成了共一第一已经有10人回复
博士申请都是内定的吗？已经有9人回复
心脉受损已经有8人回复
读博已经有5人回复

生物-医药

1楼2016-01-19 14:38:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

a2703521

金虫 (小有名气)

123

应助: 19 (小学生)
金币: 1100.4
红花: 2
帖子: 207
在线: 53小时
虫号: 3134792
注册: 2014-04-14
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

引用回帖:

11楼: Originally posted by 梦的金色城堡 at 2016-01-25 15:36:53
多谢啦，结果出来了，20度，0.4mM诱导剂16h，过柱后用了8ml洗脱液，第二天本来打算处理柱子，又加了5ml洗脱液，发现还有目的蛋白，浓度都不多，有些弱杂带，不过对我来说也算不错啦，开学再做时就用洗脱液多孵育时 ...

不用客气，以后多交流交流，互相学习！