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mario_gomez

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助,关于诱导表达目的基因的问题

大家好!本人新虫一只,有个问题想请教各位。

之前我们在E. coli里表达基因时一般都会采用IPTG诱导表达的方式来控制表达开始的时间,想请问大家是否有一种方法,可以通过加入诱导剂或者其他的方法特异地终止目的基因的表达呢?有文献介绍更好,谢谢大家!
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lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
选择特定的培养基可能抑制目的基因的表达。要终止的话得分析你无敌基因的表达原理,从上游阻断表达。
2楼2012-08-13 16:59:29
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mario_gomez

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lihao1988903 at 2012-08-13 16:59:29
选择特定的培养基可能抑制目的基因的表达。要终止的话得分析你无敌基因的表达原理,从上游阻断表达。

非常感谢你的回复,不知道目前有没有应用到这种技术的研究呢?我还没有查到有关的例子。Thank you again!
3楼2012-08-13 17:49:44
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mario_gomez

新虫 (初入文坛)

我是楼主,补充说明一下我的问题。
我需要在大肠杆菌里积累某种蛋白,在一定时间后我想通过一定的方法终止该基因的表达,请问有什么方法可以做到么?
4楼2012-08-14 10:15:39
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austere

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接将菌裂解了,不就终止了目的蛋白的表达了吗?
5楼2012-08-14 17:38:05
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mario_gomez

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by austere at 2012-08-14 17:38:05
直接将菌裂解了,不就终止了目的蛋白的表达了吗?

不行啊。。。我得先表达一段时间,再终止表达 需要一种可控的方法哦。。。
6楼2012-08-16 09:27:37
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tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以先表达,表达到你需要的程度就直接收集菌体裂解了呢!
7楼2012-08-16 10:51:59
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tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主,你是要完全终止,还是像诱导之前少量表达呢
8楼2012-08-16 10:53:21
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道表达一段时间后加入抑制剂是不是可以
9楼2012-08-16 16:15:48
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mario_gomez

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by woshizhufeng at 2012-08-16 16:15:48
不知道表达一段时间后加入抑制剂是不是可以

这个或许可行,但是我没找到类似的做法
10楼2012-08-20 00:07:15
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