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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于诱导表达问题
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lialee22

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: MolEPI+1 2017-02-18 01:08:57
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2017-02-18 01:09:10
如果实验室通用的条件做出来效果好，那就用这个条件。
如果做不出来，那么，诱导表达的所有条件都需要自己去摸索。包括但不限于诱导温度、IPTG浓度、转速。
实验室中别人的IPTG浓度0.2mM做得很好，但对于你的菌来说可能还是太高了。
如果不做正交的话，还是挺简单的。
我当初一开始也是按照前人的条件做，别人就结果很好，可我就是包涵体。最后经过摸索后，我的诱导温度、IPTG浓度都比其他人的小很多。
总之就是让它表达慢一点。不过这样的话要求你目的酶活性要高，不然量太少，后面没法做。

祝福楼主顺利~~~~~~~
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诸事顺遂
18楼2017-02-16 10:03:10
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