| 查看: 4052 | 回复: 3 | ||
新版西游记木虫 (著名写手)
|
[求助]
关于Rosetta(DE3)菌株用来做蛋白表达的相关问题。 已有2人参与
|
Rosetta(DE3)菌株相较于其他表达菌株，如BL21(DE3)，摇菌时间长才能达到OD要求。那么质粒转化Rosetta后，挑菌后应该怎么活化？氨苄青霉素和氯霉素的浓度？摇菌时间？等等。本人有一个蛋白，稀有密码子较多，还有两个连续排在一起的，所以使用Rosetta，问题是要么摇菌摇不起来，要么是耗时很长，大概17h，然后做小量诱导表达没有目的蛋白。 不完全统计，这个蛋白已经耗费我好几个月了，还没有进展，觉得生活好没有希望啊。。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有212人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 做了原核表达，表达量很低，求助~~
已经有16人回复
- 请教关于rosetta2菌株的相关信息
已经有6人回复
- 异源表达，菌株翻译时如何处理稀有密码子？
已经有16人回复
- 含有稀有密码子的基因想在大肠杆菌中做原核表达，Rosetta菌株
已经有11人回复
- 大家说说大肠杆菌表达菌株一般最大能表达多少kd的蛋白质？
已经有12人回复
- pET-30a(+)不表达
已经有16人回复
- 有谁知道原核表达菌BL21和Rosetta（DE3）之间的区别吗
已经有5人回复
- 大肠杆菌BL21菌株表达目的蛋白时，菌液破碎前后的浑浊程度变化很不明显
已经有5人回复
- pMAL载体表达重组蛋白
已经有14人回复
- pET-28a原核不能表达目的蛋白
已经有17人回复
- 原核表达蛋白诱导不出来
已经有16人回复
- 【求助/交流】分离产蛋白酶菌株
已经有18人回复
- 【讨论】蛋白质从头预测最好的方法是Rosetta吗？？
已经有12人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌中蛋白表达量偏低，大家有什么建议？
已经有28人回复
- 【求助/交流】【求助】rosetta（de3菌株），可交换
已经有11人回复
- 【求助/交流】请教原核表达菌株Rosetta gami（DE3）的生长时间
已经有4人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
新版西游记(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-14 11:42:16
新版西游记: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-04-14 15:03:32
感谢参与，应助指数 +1
新版西游记(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-14 11:42:16
新版西游记: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-04-14 15:03:32
|
使用双抗性是会对菌株的生长有影响，你可以尝试将抗生素的浓度都减半 不过实际操作的时候没有感觉到Rosseta长的有多慢啊 你还可以尝试使用1/3浓度的抗生素，只要保证是双抗性就行 还有就是，你需要转化一下BL21的菌株，看看转化后是不是也长的很慢或者不好，如果是这样的话，可能是你要表达的蛋白有毒或者能抑制大肠杆菌生长 |
2楼2014-04-14 10:47:50
3楼2014-04-14 11:59:32
4楼2014-05-06 11:30:23
