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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有谁知道原核表达菌BL21和Rosetta（DE3）之间的区别吗
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lo58688

新虫 (初入文坛)

[求助] 有谁知道原核表达菌BL21和Rosetta（DE3）之间的区别吗

大家好，最近在纯化蛋白遇到一个很奇怪的问题，我用Rosetta表达的目的蛋白，考染可以看到目的蛋白表达，但是用GST抗体却检测不到，刚开始以为是抗体的问题，我又找了一个以前师兄构建的GST融合蛋白A发现可以检测到，只是我的目的蛋白检测不到，测序没问题，不知道什么原因了，是不是Rosetta的问题啊，有必要用BL21试一下吗？万分感激
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1楼 2012-11-17 18:35:43
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gyesang

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Rosetta(DE3)菌株可能做过密码子优化，因为原核表达的时候，不是经常有什么稀有密码子问题吗，估计你听说过，Rossetta 里增加表达了稀有密码子那几个tRNA基因
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2楼2012-11-18 18:36:15
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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Rosetta系列增加了稀有密码子的表达  对于目的基因中有稀有密码子的的表达有一定的帮助
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Only the strong survive.
3楼2012-11-18 20:15:00
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lo58688

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-18 18:36:15
Rosetta(DE3)菌株可能做过密码子优化，因为原核表达的时候，不是经常有什么稀有密码子问题吗，估计你听说过，Rossetta 里增加表达了稀有密码子那几个tRNA基因

您觉得有没有必要用BL21试一下，谢谢
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4楼2012-11-19 13:02:50
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gyesang

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【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by lo58688 at 2012-11-19 13:02:50
您觉得有没有必要用BL21试一下，谢谢...

可以的，不表达的情况时有发生，只能换换载体，换换菌株。
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2012-11-19 15:51:19
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lo58688

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-19 15:51:19
可以的，不表达的情况时有发生，只能换换载体，换换菌株。...

谢谢哈
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6楼2012-11-21 20:55:15
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