24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4322  |  回复: 21
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

新人求帮助

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于诱导表达问题 已有6人参与

重组菌诱导表达后跑蛋白电泳,结果如下图。从左到右依次为maker、重组菌上清、重组菌沉淀、空菌上清和沉淀
重组载体为bl-21-pet-28a,带his-tag,诱导温度为16度,时间16小时左右
用16度诱导是看别人说低温诱导有助于蛋白的正确折叠,可是我这怎么全是包涵体
希望有人能帮我解惑!!!!!!!!!!!!

关于诱导表达问题
H5`P@E1P4E2C}GL@ZV$%R%B.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

新人求帮助

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by seascen2016 at 2017-02-14 19:01:16
IPTG吗?我们实验室用100uM
...



发自小木虫IOS客户端
9楼2017-02-14 20:48:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

seascen2016

新虫 (小有名气)

这个跟蛋白本身性质有关,有的就容易产生包涵体,楼主可以试试少加点诱导剂再试试

发自小木虫Android客户端
2楼2017-02-14 16:11:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

栾栾silence

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-02-15 07:52:41
并不是所有的原核表达蛋白都会分泌表达的,有的就是会形成包涵体,看到你的上清中其实也含有一点目的蛋白,你可以将菌体多超声,多裂解,使其充分裂解,然后只要上清中的目的蛋白,也可以就这样按照包涵体蛋白的提取方法来做。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

怀挺!
3楼2017-02-14 16:28:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

新人求帮助

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 栾栾silence at 2017-02-14 16:28:56
并不是所有的原核表达蛋白都会分泌表达的,有的就是会形成包涵体,看到你的上清中其实也含有一点目的蛋白,你可以将菌体多超声,多裂解,使其充分裂解,然后只要上清中的目的蛋白,也可以就这样按照包涵体蛋白的提取 ...

超声时间过长不是会使蛋白变性吗?这样不会影响酶活性的测定吗
4楼2017-02-14 16:45:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 274求调剂 +4 薛定谔的虎。 2026-04-01 4/200 2026-04-01 22:56 by wxiongid
[考研] 311求调剂 +13 zchqwer 2026-04-01 15/750 2026-04-01 22:30 by 2026材料调剂
[考研] 江苏科技大学招材料研究生 +4 Su032713. 2026-04-01 5/250 2026-04-01 22:03 by cccchenso
[考研] 0817化工学硕调剂 +11 努力上岸中! 2026-03-31 11/550 2026-04-01 20:30 by 赖春艳
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +7 cs0106 2026-04-01 8/400 2026-04-01 18:34 by 记事本2026
[考研] 材料与化工调剂一志愿大连海事085600,349 +9 吃的不少 2026-03-30 9/450 2026-04-01 11:24 by wangjy2002
[考研] 08工科,295,接受跨专业调剂 +6 lmnlzy 2026-03-31 6/300 2026-04-01 11:02 by 逆水乘风
[考研] 土木304求调剂 +5 兔突突突, 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:37 by JourneyLucky
[考研] 土木304求调剂 +5 顶级擦擦 2026-03-31 5/250 2026-04-01 08:15 by fdcxdystjk¥
[考研] 0856求调剂 +9 楒桉 2026-03-28 9/450 2026-03-31 19:06 by 暮泽12
[考博] 材料专业申博 +5 杜雨婷dyt 2026-03-29 5/250 2026-03-31 11:19 by oooqiao
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 297求调剂 +17 田洪有 2026-03-26 18/900 2026-03-30 18:32 by nothing投稿中
[考研] 328求调剂 +8 嗯滴的基本都 2026-03-27 8/400 2026-03-30 17:20 by Wang200018
[考研] 考研调剂 +5 Sanmu-124 2026-03-26 5/250 2026-03-30 13:36 by chemdavid
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-29 3/150 2026-03-29 12:06 by longlotian
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
信息提示
请填处理意见