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求助~!!请问如何通过实验的方法验证一段已知的DNA片段所编码出来的RNA是miRNA啊?

MIKIMIKU
新人求问,如果知道一段已知基因启动子前面的一小段DNA片段,请问如何用实验的方法去验证它是否有可能是编码miRNA的基因呢?
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为什么不含该序列的质粒模板也能扩增出条带???

dadaoxing
构建载体需要扩增出PBI121中的NPTII基因,我用了1300和水分别作为阴性对照和空白对照,但是见鬼加邪门的是,为什么,阴性对照和空白对照也能扩增出一毛一样的条带啊,而且测序都还是对的(跟PBI121中的序列完全一致),我真的是整个人都不好了,我是不管不顾...
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X染色体失活与X染色体连锁隐性致病基因

无知的小强
突然想到一个问题,请教广大高人。女性有两条X染色体,其中一条会通过甲基化等方式随机失活,只保留一条染色体有活性。有一些X染色体连锁的隐性致病基因,比如甲型血友病F8。女性有可能是携带者,不表现为血友玻那么问题来了,如果携带正常F8基因的染色体失活,女性个体是否...
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X染色体失活与X染色体连锁隐性致病基因

无知的小强
突然想到一个问题,请教广大高人。女性有两条X染色体,其中一条会通过甲基化等方式随机失活,只保留一条染色体有活性。有一些X染色体连锁的隐性致病基因,比如甲型血友病F8。女性有可能是携带者,不表现为血友玻那么问题来了,如果携带正常F8基因的染色体失活,女性个体是否...
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ATG??????????

更深的蓝888
原核表达载体,融合蛋白,必须要有ATG吗,标签在N端,不加问题应该也不大,加了也没什么问题
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连接t载后比对测序结果

cyq960720
连接t载后的序列,测序结果回来后怎么比对呀。因为pcr时是保真酶还做了加a反应
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荧光标记的ssDNA退火成dsDNA,荧光显著增加

yxl986081
1、本人合成了一段5\'荧光基团,3\'端淬灭基团标记的DNA链,还有一条与它互补的常规的DNA链;2、单独检测荧光基团和淬灭基团标记的单链DNA的荧光值为个位数(大概5左右),经过退火程序和常规DNA链退火成双链后,检测荧光数值为70左右;请问大家有没有遇到...
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pET-28a载体构建时,KAN浓度是加100μg/ml,还是50μg/ml

JH5HJ
pET-28a载体构建时,KAN浓度是加100μg/ml,还是50μg/ml
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转基因拟南芥的筛选后培养

Qi思72
转基因拟南芥的筛选后培养求问转基因拟南芥用潮霉素培养基筛选后如何移出和移出后如何培养?
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qPCR扩增曲线弯曲

小顽货
PCR扩增曲线在上升趋势时突然拐弯(图1),并且稀释一万倍和一千倍ct值一样(图2)。
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使用Micro-checker出现问题了

yy小太阳
我有两个位点显示数据错误,但是是和其他位点一起做的,格式都是一样的,相差碱基什么的都一致,不知道哪里出现问题了,可以帮我一下吗?
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提交序列至NCBI后,说我序列质量低

Demon黄
请教各位大神,我向NCBI提交序列,出现了问题,首先说一下我的这个序列是经过测序验证过的,但是为什么说我序列质量低呢?请大家看看发过来的邮件,帮帮孩子吧!Wenoticedthatregionsofyoursequence(s)includenumerousa...
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质粒提取浓度一百多,为什么核酸电泳没有条带呢?

实验小白.
各位大神,请教一个问题,我现在在做质粒提取,用的是质粒提取试剂盒,浓度是14ng/ul,然后核酸电泳,照胶没有条带,这是为什么呢?
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连接转化无菌落生长。求推荐好用的T载。

XiaoMCF
有没有好用的T载可推荐。最近的连接转化实验一直没有菌落生长,对照也没有菌落生长,不知道什么情况,求助。
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DPBF测单线态氧

薛腚饿的猫
想用DPBF测单线态氧,但是发现不加光敏剂的空白样,即单纯的DPBF在光激发下就会使得吸收强度的降低,那怎么判断是光敏剂产生的作用还是单纯的DPBF分解,让吸收强度降低的
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新手求助,pSilent-1-目的基因沉默载体的构建

有所为4312
选的目的基因保守结构域分别正向和反向插入多克隆位点MSC1和MSC2,中间有一段内含子序列,想使其成为发夹结构,从而干扰目的基因的表达。想请问在构建载体的时候需要正向和内含子以及反向序列形成一个完整的编码区吗?它们中间有终止密码子可以吗?还想问一下基因沉默是选...
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交换黑色素瘤细胞

sakimia
请问谁有黑色素瘤细胞可以交换或购买吗?我有B16和A375如题,需要一些黑色素瘤细胞系:501MEL、SKmel147、SKmel2、SKmel28、SKmel239、SKmel197、SKmel94、SKmel100、SKmel173、SKmel29、SKm...
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核酸检测实验中如何防范气溶胶污染

小小书虫飞
科研和临床检验场所PCR分子实验使用频率较高,PCR实验怕出问题了,当PCR出现假阳性的时候,我们常常会考虑是不是引物、试剂、Mix、模板、水等发生了污染,然后逐一排查,有时还是找不到原因,耗时耗力。那么这些试剂和仪器到底为什么会被污染了呢?其实有很大因素是核...
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native-page 条带太奇怪了,求助大佬帮忙分析!!感谢!

juew
各位大神,为啥我的DNA跑出来最下面有条长两条带啊?好几次重复实验都是这样。之前没用marker的时候没有,自从开始用marker之后就这样了,不知道是不是marker的...
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求助thp1和Raw264.7细胞,可以互相细胞

陈奎达
最近一直在做免疫细胞实验,需要这两种细胞,谁可以馈赠一些嘛?万分感谢,或者可以互换细胞
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求32位64位primer 5设计软件

chenju123
求:32位64位的primerpremier5破解软件!!!!
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RPA重组聚合酶扩增

1303675733
RPA重组聚合酶扩增速度快的原因及其原理是什么?求!
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曲霉菌基因敲除

帕戴维
曲霉菌进行基因敲除后,形态变化验证后还是野生型,这种情况怎么解释?
分子生物
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曲霉菌基因敲除

帕戴维
曲霉菌进行基因敲除后,形态变化验证后还是野生型,这种情况怎么解释?
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求助帖:质粒提取摇菌失败求助

Sily2020
新手第一次做质粒转化,挑菌、提取,做的是PNL-4-3这个质粒,转化使用热激法,质粒+感受态细胞stbl3结合冰浴30min,热激90s,在冰浴2min,加1ml的无抗L...
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共聚焦细胞不平整有很多小泡

ZPGaptamer
A549细胞状态还可与无毒性样品孵育固定30min(也尝试15min)后洗三次10min/次,拍的时候总是发现细胞膜不平整有很多小泡,而不固定的话就没有很明显,有遇到相似情况的虫友指教下谢谢~
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重组酶酶活测定

JH5HJ
使用pGEX-4T-1载体与我的目的基因重组,在大肠BL21中表达我的酶,破碎后去上清,测酶活,现象非常奇怪,上清与底物混合后不用反应就可以得到产物,而且灭活组是没有的,跑了SDS-PAGE在目的区太多杂蛋白无法区分,想问问大家这个上清中有没有可以某种物质可以...
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求助原核表达载体pCold-TF

一星子剪影
各位虫友,谁有pCold-TF表达载体,能否赐一点?因为一个蛋白在pET,pGEX系列载体都不能表达,而最近一篇文章中通过pCold-TF表达该蛋白,所以想尝试用这个载体表达试一试。谢谢各位虫友,有的话能否赐一点~最后祝各位虫友实验顺利,新年快乐~
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表达的蛋白质用tev酶切割后,目标蛋白无法与原蛋白分离

lostunit
表达的蛋白质用tev酶切割后,目标蛋白无法与原蛋白分离
分子生物
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