链置换反应不能发生
最近在做DNA链置换方面的实验,反应在PBS中进行,其中链A、T、B的浓度试了两组,10nM、1nM、5nM一组,50nM、1nM、25nM一组。链A和链T结合,链B可以与链A结合从而将链T置换下来,从而链T能够继续参与反应,实现链T量的放大。但是实验结果发现没有出现信号放大,求助各位大佬,可以从哪些方面尝试一下。(链A是分子信标,链T是靶标,链B理论上可以将靶标置换下来,从反应结果看,链A和链T能够反应,链A和链B也能反应)
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最近在做DNA链置换方面的实验,反应在PBS中进行,其中链A、T、B的浓度试了两组,10nM、1nM、5nM一组,50nM、1nM、25nM一组。链A和链T结合,链B可以与链A结合从而将链T置换下来,从而链T能够继续参与反应,实现链T量的放大。但是实验结果发现没有出现信号放大,求助各位大佬,可以从哪些方面尝试一下。(链A是分子信标,链T是靶标,链B理论上可以将靶标置换下来,从反应结果看,链A和链T能够反应,链A和链B也能反应)
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加热再冷却
字数补丁
请问“加热再冷却”可以说的详细一点吗?具体是哪个步骤
混合后测信号前加热到95然后冷却到室温
刚刚注意到你的a是过量的,应该保证b的当量是过量的
核酸扩增的buffer是PBS,这个不常用吧,Mg(II)浓度会受影响么?离子浓度会不会高了?
请问建议用什么缓冲溶液呀
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好的 感谢
Tris, Hepes一般用的比较多,PBS用来做扩增反应不多见。