24小时热门版块排行榜    

查看: 4010  |  回复: 3

ocean_chris

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于转录组测序建库的问题 已有2人参与

最近在了解一些高通量测序相关的知识,对建库方面有些不了解,所以想请了解的大神帮忙解答一下。不胜感激!
     1. 转录组测序在建库时有一步是RNA片段反转录合成cDNA第一链,然后再合成第二链cDNA,之后加测序接头,最后PCR扩增建库。这里为什么要合成第二链后才加接头?为什么不直接在第一链加接头就直接PCR扩增?这样在PCR扩增的时候不也一样合成了第二链了吗?
     2. 还有一种连特异性建库的时候,是在第二条链合成的时候用U代替T,然后双链加接头,之后降解掉含U的第二条链,最后也要PCR富集建库,这里不明白的是降解掉第二条链了之后又PCR的话,不久又有第二条链合成了吗?
       还请大家帮忙解答一下~谢谢~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

高通量测序

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

he龙行天下

木虫 (小有名气)

同求答案

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-07-07 23:34:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

great07225388

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.大哥,如果在第一链上加接头,你一条单链怎么做pcr反应?两条引物怎么结合模板?2.是pcr完之后加ung酶降解的,不是降解之后pcr的。艾玛,打字打的我手疼。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-07-10 00:41:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

查找文献

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

接头是双链的,链特异建库只是以一条链做模板,最后文库还是双链。
4楼2017-03-07 15:56:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ocean_chris 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然评审意见 +12 wangmingqi 2026-08-28 17/850 2026-08-29 08:43 by appleren
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 07:46 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-29 07:32 by winsaint
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 05:45 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +13 晴天加油 2026-08-26 14/700 2026-08-28 18:36 by huagongfeihu
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见