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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

[求助] 求转录组测序相关文章已有2人参与

想要做一种植物的转录组测序,但是它没有基因组测序也没有NCBI中也没有EST序列,这样的话后期分析有意义吗?
求植物方面的转录组测序相关的代表文章,好参考参考
谢谢
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观止矣

木虫 (小有名气)

蠹虫

★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+5, 鼓励交流 2013-11-16 11:29:43
引用回帖:
3楼: Originally posted by 憨憨可爱多 at 2013-10-15 15:03:30
我是想做几种不同倍性的植物的转录组差异,筛选差异表达基因,这样没有参考基因容易不...

容不容易做其实无所谓,都是送出去。一般而言,无参考基因组的转录组,一般有几个步骤:
1)对原始数据进行去除接头序列及低质量reads的处理;
2)数据产出统计及测序数据的成分和质量评估;
3)组装结果分析;
4)Unigene功能注释及COG分析;
5)Unigene的GO分类;
6)Unigene代谢通路分析;
7)预测编码蛋白框(CDS);
8)Unigene表达差异分析;
9)Unigene在样品间的差异GO分类和Pathway富集性分析;
10)SNP分析(仅针对真核生物);
11)SSR开发及引物设计(仅针对真核生物)。
当然,最重要的RNA-seq肯定是做不了的,因为没有基因组信息。
多倍体转录组目前研究的人非常少,如果你打算做的话,可以做最基本的一些分析,也能发paper的,嘿嘿。
话说回来,不知道你的多倍体是自然加倍还是人工加倍,是同源还是异源,你可以多看一些文献,多倍体的转录翻译都与一般的二倍体存在很大差异。多看综述哦。
做人要知足,做事要知不足,做学问要不知足。
9楼2013-10-17 20:19:25
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jasco

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 憨憨可爱多 at 2013-10-15 15:03:30
我是想做几种不同倍性的植物的转录组差异,筛选差异表达基因,这样没有参考基因容易不...

这个目的的话,做消减文库更直接
6楼2013-10-16 13:49:26
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普通回帖

观止矣

木虫 (小有名气)

蠹虫

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-10-15 10:41:55
可以选择无参考基因组的转录组,虽然可能不如有参考基因组的准确,但一般来说还是有一定意义的。你首先要设计好实验,不要盲目上手,一定选好对照和实验株系,做好重复,提取RNA要过关,测序深度要适当。总之就是比较费钱,哈哈。
做人要知足,做事要知不足,做学问要不知足。
2楼2013-10-15 09:20:17
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 观止矣 at 2013-10-15 09:20:17
可以选择无参考基因组的转录组,虽然可能不如有参考基因组的准确,但一般来说还是有一定意义的。你首先要设计好实验,不要盲目上手,一定选好对照和实验株系,做好重复,提取RNA要过关,测序深度要适当。总之就是比 ...

我是想做几种不同倍性的植物的转录组差异,筛选差异表达基因,这样没有参考基因容易不
3楼2013-10-15 15:03:30
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文库构建

铁虫 (小有名气)


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构建细菌人工染色体文库(BAC文库),建好之后筛库就行了。
4楼2013-10-16 09:13:06
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 文库构建 at 2013-10-16 09:13:06
构建细菌人工染色体文库(BAC文库),建好之后筛库就行了。

谢谢
5楼2013-10-16 09:26:45
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taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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6楼: Originally posted by jasco at 2013-10-16 13:49:26
这个目的的话,做消减文库更直接...

消减文库果断好啊,做转录组测序的话没戏,一点戏都没有,连参考基因组序列都没有,测出来的RNA序列都没法拼接的,做不了RNAseq的
用心
7楼2013-10-16 16:00:40
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jasco at 2013-10-16 13:49:26
这个目的的话,做消减文库更直接...

谢谢
8楼2013-10-16 16:01:41
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

内容已删除
10楼2013-10-20 09:33:34
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