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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 植物转录组测序 已有14人参与

最近设计实验,想弄清龙胆苷类代谢途径,首先想到了转录组测序,找代谢相关基因。龙胆的基因组还没有测序,测序后是无参照的。进行转录组测序有什么要求,需要注意哪些问题?可以选用拟南芥做参照进行功能注释吗?希望做过转录组的同志们指点指点,谢谢!
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追梦的人
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gaoyang636

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
先暂时把怎么分析这个问题放到一边,先请教一下这个实验打算怎么设计呢?
目的已经明确了:龙胆(物种)苷类代谢途径(对象)
那么:你手头是有这个苷类代谢的 异常表型(突变)株么? 还是 通过某种刺激可以实现 明显改变这个苷类代谢途径?
如果都没有,仅仅是有这个植物……那么直接测个转录组|蛋白组,甚至基因组,对研究某个很具体的途径来说,都不会有多么好的提示作用。
大体意思其实就是:得有个对照组+实验组的组合
5楼2012-11-23 08:56:11
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anan_1223

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
说一下我的浅见哦!您想找苷累代谢途径在转录组层次上研究是对的,一般有两种方法,一个是利用数字化表达谱(高通量测序方法),一个是定制个性化基因芯片。不过因为龙胆没有基因组参照,基因芯片是没有办法实现的,只能从测序方面进行。这有个方案供您参考:首先需要找一个普通或者说是对照龙胆,测一下转录组,至于参考序列吗,用拟南芥也可以,不过我不知道龙胆和拟南芥在物种分类上差距有多大,最好找一个与龙胆最相近的测序完成的并且注释比较全的物种,这样做相当于构建了一个龙胆的转录组平台,对于您后期研究在转录组层次上的各个变化都是一个参照。接下来,就是您要准备处理和对照样品,其中对照可以与测序的那个一样,处理是相对于对照,苷类代谢变化比较大的(这部分我不是很懂,您看看是什么处理与苷类代谢有关),也可以设不同的时间点作为比较。之后对处理和对照样本进行数字化升级版表达谱测序,分析两者之间的差异,找出苷类代谢途径,这个费用很便宜,其实主要费用还是在平台构建,呵呵!希望对您有帮助,可以联系我,anan_1223@sina.com。相互探讨。
7楼2012-12-07 09:39:14
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llyman

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
最近也在设计测序,但是有点担心对照和处理组测出来的结果差异不大,纠结中,怎么办
9楼2013-01-21 20:19:58
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普通回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
嗯.............
       木做过,帮顶,挺感兴趣的,希望有高手指点
Let God do with it as He wills
2楼2012-10-05 11:25:46
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crab922

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没有高手回复呀,我也很想学习这个。
3楼2012-11-22 21:46:00
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想学习这方面知识,期待高人出现
4楼2012-11-22 23:03:04
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zhengck1983

铁虫 (初入文坛)

感兴趣
6楼2012-11-23 10:55:55
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-11-23 08:56:11
先暂时把怎么分析这个问题放到一边,先请教一下这个实验打算怎么设计呢?
目的已经明确了:龙胆(物种)苷类代谢途径(对象)
那么:你手头是有这个苷类代谢的 异常表型(突变)株么? 还是 通过某种刺激可以实现 ...

对照:龙胆的叶片;
实验组:龙胆的根
苷类代谢在根中合成和累积,在叶中则很少或没有
追梦的人
8楼2012-12-09 17:45:04
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小小树虫

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用拟南芥做参考基因不一定有用的 个人认为参考价值不大
10楼2013-03-08 10:35:59
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