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关于转录组测序建库的问题 已有2人参与
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最近在了解一些高通量测序相关的知识，对建库方面有些不了解，所以想请了解的大神帮忙解答一下。不胜感激！ 1. 转录组测序在建库时有一步是RNA片段反转录合成cDNA第一链，然后再合成第二链cDNA，之后加测序接头，最后PCR扩增建库。这里为什么要合成第二链后才加接头？为什么不直接在第一链加接头就直接PCR扩增？这样在PCR扩增的时候不也一样合成了第二链了吗？ 2. 还有一种连特异性建库的时候，是在第二条链合成的时候用U代替T，然后双链加接头，之后降解掉含U的第二条链，最后也要PCR富集建库，这里不明白的是降解掉第二条链了之后又PCR的话，不久又有第二条链合成了吗？ 还请大家帮忙解答一下~谢谢~ |
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 高通量测序 |
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2楼2015-07-07 23:34:51
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