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qaz139687

新虫 (小有名气)

[求助] TA克隆相关问题已有8人参与

PCR产物用PMD 19T载体  16℃过夜连接后，与DH5感受态细胞转化，涂平板，挑菌，液体培养基培养后，菌液变浑浊，然后做了菌落PCR有目的条带，送公司测序，公司说菌落浓度太低，这是为什么？是我感受态的问题吗
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1楼2015-07-04 23:14:09
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lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
qaz139687: 金币+1, ★有帮助 2015-07-06 16:01:51
引用回帖:
5楼: Originally posted by qaz139687 at 2015-07-05 19:24:19
我培养了5h后，做完菌落PCR就送去测序了，不是说摇菌太久的话会细菌死亡或者是amp会失效？请问下摇菌的话摇多少小时后送测比较好，之前一次摇了24个小时，公司说我的细菌都不长，说我摇太久了。另外菌液送公司的话 ...

12-18小时之间吧，24太长，5小时又太短了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2015-07-05 20:56:35
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qaz139687

新虫 (小有名气)
来个人指点指点啊
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2楼2015-07-05 13:25:08
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a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
公司可以帮你转化了之后再抽提质粒测序的，估计是他们不愿意
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3楼2015-07-05 14:42:12
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ppppppppp

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
送测序的菌需要继续培养的，只是浑浊肯定不行，因为他们也要先抽质粒再测序的。菌落pcr和测序对菌浓度要求应该不一样的。
赞一下(2人) 回复此楼
初来乍到，请多指教
4楼2015-07-05 14:56:56
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