应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒非单克隆，怎么办？
81/1返回列表
查看: 4554  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

南山石

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 质粒非单克隆，怎么办？ 已有4人参与

请教大家，我经过酶切验证后送测序的一个目的基因的质粒，测序公司回报结果说非单克隆，我接下去该怎么做然后再次送去测序？有没有解决过同样问题朋友们？小弟在这里谢谢大家的帮助！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

测序相关问题

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-24 20:35:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 21:11:57
把你的菌划线挑单克隆摇菌重新测序。
赞一下 回复此楼
hehe
2楼2014-02-24 20:50:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 21:12:16
1.提质粒
2.根据质粒大小，分出正确的，回收。
3.把质粒直接转入DH5a转化，挑单克隆。
赞一下 回复此楼
3楼2014-02-24 20:56:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 21:12:10
楼主实验过程中污染了吧？建议挑单克隆扩大培养后再送测序
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
4楼2014-02-24 21:07:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

南山石

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-24 21:07:12
楼主实验过程中污染了吧？建议挑单克隆扩大培养后再送测序

哦，我用这个送测序的质粒重新转化，扩大培养再挑取单克隆，送测序，是这样做吗？
赞一下 回复此楼
5楼2014-02-24 21:17:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-25 11:57:41
引用回帖:
5楼: Originally posted by 南山石 at 2014-02-24 21:17:11
哦，我用这个送测序的质粒重新转化，扩大培养再挑取单克隆，送测序，是这样做吗？...

先转化质粒，涂板后挑克隆摇出来的菌液就可以送测序，不过送测序前最好再验证一下
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
6楼2014-02-24 21:46:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiyiyaya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-25 11:57:44
也可以将提取正确的质粒重新转化，挑菌，好好提一次质粒。鉴定正确可直接送DNA测序，也可给对方对应的菌体。如果说信号不好，可能也存在质粒拷贝数低的情况。
赞一下 回复此楼
7楼2014-02-24 22:00:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

南山石

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by shiyiyaya at 2014-02-24 22:00:57
也可以将提取正确的质粒重新转化，挑菌，好好提一次质粒。鉴定正确可直接送DNA测序，也可给对方对应的菌体。如果说信号不好，可能也存在质粒拷贝数低的情况。

非常感谢您的回复！
赞一下 回复此楼
8楼2014-02-25 10:54:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 南山石 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭