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做TA克隆的时候,用什么做阴性对照
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| 向老外要了个目的DNA的质粒,是用TA克隆做的,连带载体也给我寄过来了(这里要感谢老外,真的很友好,直接寄FEDEX过来),两个质粒我都转化了,且能抽出质粒,后面想想不对劲,TA克隆用的载体不是线性的吗?怎么也能够转化呢?不解?目的DNA的质粒我测过序了,的确是包含TA克隆载体的目的DNA质粒,但是载体没有送去测序。这里希望大家能够解答,谢谢! |
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【求助/交流】大家做TA克隆、蓝白斑筛选用什么样的感受态细胞?
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9楼2014-05-29 10:46:58
antibodyknow
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2楼2014-05-26 22:13:49
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5楼2014-05-28 12:55:15
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lmc2537(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-29 13:23:07
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你的载体的转化率高么? 在载体片段化过程中,可能会混有非常非常非常少量的未能线性化的质粒。 阴性对照一般有两个:1. 只有感受态细菌;2. 不加入载体片段,加入连接酶,然后转化。 都要走完整个转化过程。 如果你实在感兴趣时怎么连的,那就测一个反应吧。 |
6楼2014-05-28 13:05:02
7楼2014-05-28 15:31:58
8楼2014-05-29 08:41:55
10楼2014-05-29 10:50:24













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