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做TA克隆的时候，用什么做阴性对照
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| 向老外要了个目的DNA的质粒，是用TA克隆做的，连带载体也给我寄过来了（这里要感谢老外，真的很友好，直接寄FEDEX过来），两个质粒我都转化了，且能抽出质粒，后面想想不对劲，TA克隆用的载体不是线性的吗？怎么也能够转化呢？不解？目的DNA的质粒我测过序了，的确是包含TA克隆载体的目的DNA质粒，但是载体没有送去测序。这里希望大家能够解答，谢谢！ |
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【答案】应助回帖
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lmc2537(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-29 13:23:07
lmc2537: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-05-30 09:28:51
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lmc2537: 金币+1 2014-09-01 13:10:04
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lmc2537: 金币+1 2014-09-01 13:10:04
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你的载体的转化率高么？ 在载体片段化过程中，可能会混有非常非常非常少量的未能线性化的质粒。 阴性对照一般有两个：1. 只有感受态细菌；2. 不加入载体片段，加入连接酶，然后转化。 都要走完整个转化过程。 如果你实在感兴趣时怎么连的，那就测一个反应吧。 |
6楼2014-05-28 13:05:02
antibodyknow
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2楼2014-05-26 22:13:49
3楼2014-05-27 09:39:14
4楼2014-05-27 13:14:16
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