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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)

[求助] 转化后阳性克隆长得比较慢是什么原因?!

在做亚克隆的转化后平板上有阳性克隆,但是菌落比较小,长得比较慢,是什么原因啊?!
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冰泉cathy

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-06-18 13:43:52
有可能是因为抗生素浓度太高了,菌落生长需要更长的时间。
还有一种可能就是结果是假阳性,希望楼主好运啊!
2楼2012-06-18 10:26:14
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healerly

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

3楼2012-06-18 15:45:52
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
培养基平板是不是放的时间太长了,转化最好是用当天或者最近倒的平板,以免平板太干~~~
4楼2012-06-18 16:18:20
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 冰泉cathy at 2012-06-18 10:26:14
有可能是因为抗生素浓度太高了,菌落生长需要更长的时间。
还有一种可能就是结果是假阳性,希望楼主好运啊!

现在已经做完菌落PCR的鉴定了,是有阳性克隆的,那是不是说就是抗生素的浓度太高?
5楼2012-06-18 16:27:26
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by healerly at 2012-06-18 15:45:52
amp浓度的原因~~~菌落小不要紧,能直接往下做,做一下鉴定,继续下一步实验呗,为什么非要让长的很大呢?

菌落小的话不是活性也比较小吗?而且转接的时候菌长得也是比较慢的啊
6楼2012-06-18 16:28:44
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2012-06-18 16:18:20
培养基平板是不是放的时间太长了,转化最好是用当天或者最近倒的平板,以免平板太干~~~

平板都是最近倒的,应该不会是平板的原因吧,我用原质粒做了对照,那个长得就很快也很好的
7楼2012-06-18 16:49:20
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

会不会是你表达的蛋白对大肠杆菌的生长有影响呢?
8楼2012-06-18 19:20:41
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dajiong

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 冰泉cathy at 2012-06-18 10:26:14
有可能是因为抗生素浓度太高了,菌落生长需要更长的时间。
还有一种可能就是结果是假阳性,希望楼主好运啊!

原来抗生素浓度高也是问题呀~难怪我的长的也会慢。不过你们一般用多少浓度的呢?我是amp:LB=1::1000的加的,这样算不算高?
哦也
9楼2012-06-18 22:36:19
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suifeng91

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
9楼: Originally posted by dajiong at 2012-06-18 22:36:19
原来抗生素浓度高也是问题呀~难怪我的长的也会慢。不过你们一般用多少浓度的呢?我是amp:LB=1::1000的加的,这样算不算高?...

Amp的保存液浓度是多少?另外菌落大小也和细胞有关系,你用的什么感受态?
人生不是一场物质的盛宴,而是一次灵魂的修炼,使它在谢幕之时比开幕之初更为高尚。
10楼2012-06-18 23:41:00
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