24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1380  |  回复: 4

liulianwei

铁虫 (初入文坛)

[求助] 微卫星标记开发过程送测序的阳性克隆如何

大家好:
我现在做微卫星标记的开发,二次PCR后连接转化,挑取阳性克隆送测序,阳性克隆如何选择,有什么要求吗,谢谢!(附件是照片,2条带以上是阳性克隆)
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rommel1941

铁杆木虫 (正式写手)

情定山河

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励,很热心哦 2012-04-10 09:28:49
微卫星标记关注的大多还是其motif的样式,阳性克隆当然是越多越好,当然,挑取一些后了解其motif样式,再设计荧光引物,进行PCR,之后以Genescan来判断其长度和等位基因间的差异,并根据具体问题进行分析。祝好
将相本无种★男儿当自强
2楼2012-04-10 00:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a850924t

新虫 (小有名气)

请教下您这个为什么会有那么多条带?是用什么方法啊?胶的浓度是多少?谢谢了
欢迎与喜爱进化的朋友交流
3楼2012-04-12 00:56:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rommel1941

铁杆木虫 (正式写手)

情定山河

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助哦 2012-04-12 13:43:15
条带多有几个原因
1.引物优化没有彻底,还存在很多的非特异扩增
2位点的多态性较高
一般使用1.5%的胶就可以
将相本无种★男儿当自强
4楼2012-04-12 09:47:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lfangd1

新虫 (小有名气)

额是新手,想请教一下楼主,您做的二次PCR,是巢氏PCR,还是普通PCR?第一次P过后有跑胶吗?有的话是琼脂糖胶还是PAGE?如何判断是阳性克隆啊?是将菌液做双酶切吗?
5楼2012-04-14 10:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liulianwei 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂 +8 春日来信- 2026-04-03 8/400 2026-04-05 18:58 by 蓝云思雨
[考研] 材料工程302分求调剂 +8 zyx上岸! 2026-04-04 8/400 2026-04-05 18:48 by 蓝云思雨
[考研] 080200学硕,机械工程专业277分,求带走! +7 瓶子PZ 2026-03-31 7/350 2026-04-05 17:49 by liucky
[考研] 282求调剂 +7 aaa车辆 2026-04-02 11/550 2026-04-05 17:24 by yulian1987
[考研] 求调剂 +6 张.1 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:30 by imissbao
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 一志愿085404,总分291,四级已过,求调剂 +5 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 7/350 2026-04-04 13:23 by 莲菜就是藕吧
[考研] 0710生物学336分求调剂 +6 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-04 10:10 by kiyy
[考研] 268求调剂 +8 你好tg 2026-04-03 9/450 2026-04-04 05:08 by gswylq
[考研] 357求调剂 +13 1050389037 2026-04-03 13/650 2026-04-03 22:27 by 无际的草原
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +39 洛神哥哥 2026-03-31 41/2050 2026-04-03 21:51 by qlm5820
[考研] 372分材料与化工(085600)一志愿湖南大学求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-03 4/200 2026-04-03 17:58 by Jimmyandyou
[考研] 考研调剂 +3 Draa 2026-04-03 3/150 2026-04-03 17:37 by hgwz7468
[考研] 309求调剂 +14 呆菇不是戴夫 2026-04-02 14/700 2026-04-03 09:42 by 蓝云思雨
[考研] 285求调剂 +8 AZMK 2026-04-02 11/550 2026-04-02 20:16 by yulian1987
[考研] 348求调剂 +11 zzzzyk123 2026-04-01 11/550 2026-04-02 16:52 by Wang200018
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕,求调剂,接受其他专业 +6 what张 2026-04-01 7/350 2026-04-02 16:48 by zzsw+
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 09:15 by olim
[考研] 085602化学工程268分蹲调剂 +8 月照花林。 2026-04-01 8/400 2026-04-01 22:08 by 无际的草原
[考博] 材料专业申博 +5 杜雨婷dyt 2026-03-29 5/250 2026-03-31 11:19 by oooqiao
信息提示
请填处理意见