24小时热门版块排行榜    

查看: 1368  |  回复: 4

liulianwei

铁虫 (初入文坛)

[求助] 微卫星标记开发过程送测序的阳性克隆如何

大家好:
我现在做微卫星标记的开发,二次PCR后连接转化,挑取阳性克隆送测序,阳性克隆如何选择,有什么要求吗,谢谢!(附件是照片,2条带以上是阳性克隆)
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rommel1941

铁杆木虫 (正式写手)

情定山河

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励,很热心哦 2012-04-10 09:28:49
微卫星标记关注的大多还是其motif的样式,阳性克隆当然是越多越好,当然,挑取一些后了解其motif样式,再设计荧光引物,进行PCR,之后以Genescan来判断其长度和等位基因间的差异,并根据具体问题进行分析。祝好
将相本无种★男儿当自强
2楼2012-04-10 00:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a850924t

新虫 (小有名气)

请教下您这个为什么会有那么多条带?是用什么方法啊?胶的浓度是多少?谢谢了
欢迎与喜爱进化的朋友交流
3楼2012-04-12 00:56:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rommel1941

铁杆木虫 (正式写手)

情定山河

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助哦 2012-04-12 13:43:15
条带多有几个原因
1.引物优化没有彻底,还存在很多的非特异扩增
2位点的多态性较高
一般使用1.5%的胶就可以
将相本无种★男儿当自强
4楼2012-04-12 09:47:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lfangd1

新虫 (小有名气)

额是新手,想请教一下楼主,您做的二次PCR,是巢氏PCR,还是普通PCR?第一次P过后有跑胶吗?有的话是琼脂糖胶还是PAGE?如何判断是阳性克隆啊?是将菌液做双酶切吗?
5楼2012-04-14 10:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liulianwei 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +9 一鸭鸭哟 2026-03-14 11/550 2026-03-19 17:22 by !本暗一次!
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 10/500 2026-03-19 16:05 by 余麟余
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[考研] 材料专硕英一数二306 +5 z1z2z3879 2026-03-18 5/250 2026-03-19 07:43 by BruceLiu320
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +7 步川酷紫123 2026-03-13 7/350 2026-03-18 17:12 by 尽舜尧1
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +7 ZY-05 2026-03-13 8/400 2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见