应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 转化后阳性克隆长得比较慢是什么原因？！
91/1返回列表
查看: 2732  |  回复: 18
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)

[求助] 转化后阳性克隆长得比较慢是什么原因？！

在做亚克隆的转化后平板上有阳性克隆，但是菌落比较小，长得比较慢，是什么原因啊？！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-06-17 10:01:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冰泉cathy at 2012-06-18 10:26:14
有可能是因为抗生素浓度太高了，菌落生长需要更长的时间。
还有一种可能就是结果是假阳性，希望楼主好运啊！

现在已经做完菌落PCR的鉴定了，是有阳性克隆的，那是不是说就是抗生素的浓度太高？
赞一下 回复此楼
5楼2012-06-18 16:27:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by healerly at 2012-06-18 15:45:52
amp浓度的原因~~~菌落小不要紧，能直接往下做，做一下鉴定，继续下一步实验呗，为什么非要让长的很大呢？

菌落小的话不是活性也比较小吗？而且转接的时候菌长得也是比较慢的啊
赞一下 回复此楼
6楼2012-06-18 16:28:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2012-06-18 16:18:20
培养基平板是不是放的时间太长了，转化最好是用当天或者最近倒的平板，以免平板太干~~~

平板都是最近倒的，应该不会是平板的原因吧，我用原质粒做了对照，那个长得就很快也很好的
赞一下 回复此楼
7楼2012-06-18 16:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2012-06-18 19:20:41
会不会是你表达的蛋白对大肠杆菌的生长有影响呢？

应该不会，别人有做出来的！我在想是不是我的操作在哪个地方有什么不妥
赞一下 回复此楼
11楼2012-06-19 08:38:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by suifeng91 at 2012-06-18 23:41:00
Amp的保存液浓度是多少？另外菌落大小也和细胞有关系，你用的什么感受态？...

一般情况下Amp的浓度要多少？JM109的感受态应该不会长很慢的吧
赞一下 回复此楼
12楼2012-06-19 08:42:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by suifeng91 at 2012-06-19 08:47:27
AMP终浓度50ug/ml, JM109生长应该不慢。别人用过你的板子吗？情况一样吗？

别人没有出现过这种情况，而且我以前做的时候也没出现过这种情况，就是最近做亚克隆要么转化后没有阳性克隆要么就是长得很慢
赞一下 回复此楼
14楼2012-06-19 09:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 冰泉cathy at 2012-06-19 09:13:00
个人就觉得菌落PCR的成功率要在80%以上才有可以信度，因为它的准确性不是很高。测序相对来说，比菌落PCR更靠谱。...

我们做菌落PCR也只是先验证一下，然后就送样测序！但是菌的活性好像真的不是很高，就连摇瓶时菌浓也很低
赞一下 回复此楼
17楼2012-06-19 10:20:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 飘零的叶子 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭