24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2524  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lmc2537

铜虫 (小有名气)

[求助] 做TA克隆的时候,用什么做阴性对照

向老外要了个目的DNA的质粒,是用TA克隆做的,连带载体也给我寄过来了(这里要感谢老外,真的很友好,直接寄FEDEX过来),两个质粒我都转化了,且能抽出质粒,后面想想不对劲,TA克隆用的载体不是线性的吗?怎么也能够转化呢?不解?目的DNA的质粒我测过序了,的确是包含TA克隆载体的目的DNA质粒,但是载体没有送去测序。这里希望大家能够解答,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smdsfy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
“的确是包含TA克隆载体的目的DNA质粒”
那还构建啥呢?
7楼2014-05-28 15:31:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

antibodyknow

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-27 14:18:54
购买的TA克隆载体的确是线性化,但当把目的基因克隆至载体后,将成为环状质粒了。老外送给你的质粒应该是鉴定正确的单克隆质粒,制备的质粒DNA当然是超螺旋环状DNA,自然能够转化进感受态细胞
2楼2014-05-26 22:13:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lmc2537

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by antibodyknow at 2014-05-26 22:13:49
购买的TA克隆载体的确是线性化,但当把目的基因克隆至载体后,将成为环状质粒了。老外送给你的质粒应该是鉴定正确的单克隆质粒,制备的质粒DNA当然是超螺旋环状DNA,自然能够转化进感受态细胞

我的意思是没有连目的基因的质粒怎么也能转化?(老外在一张滤纸上画了两个圈一个是连有目的基因的,一个是没有连的)
3楼2014-05-27 09:39:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白菜吃虫

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-27 14:19:01
lmc2537: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-29 08:42:17
你再仔细看看目的片段的插入位点在哪里,仔细观察插入位点附近的碱基,看看是否是TA克隆。我们一般购买的克隆载体也是从环状的质粒经过处理后得到的线性片段。
4楼2014-05-27 13:14:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297,工科调剂? +3 河南农业大学-能 2026-04-14 3/150 2026-04-15 22:02 by noqvsozv
[考研] 296求调剂 +12 汪!?! 2026-04-09 13/650 2026-04-15 20:01 by 学员JpLReM
[考研] 327求调剂 +24 Xxjc1107. 2026-04-13 26/1300 2026-04-15 19:27 by coolfishwll
[考研] 22专硕求调剂 +9 haoyun上岸 2026-04-11 11/550 2026-04-15 14:47 by elainzaizai
[考研] 材料专业344求调剂 +17 hualkop 2026-04-10 22/1100 2026-04-14 16:21 by sxdj2
[考研] 290求调剂 +21 luoziheng 2026-04-10 23/1150 2026-04-14 15:49 by zs92450
[考研] 071000生物学调剂求助 +18 zzzzwww 2026-04-09 21/1050 2026-04-14 15:39 by zs92450
[考研] 考研求调剂 +6 ban班小七 2026-04-11 6/300 2026-04-14 14:06 by 哆啦A梦只是个梦
[考研] 一志愿华工085600 331分 +7 天下ww 2026-04-09 7/350 2026-04-13 09:01 by lhj2009
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 电气工程专硕320求调剂 +5 小麻子111 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:47 by zhouyuwinner
[考研] 303求调剂 +14 SereinQ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 20:43 by 蓝云思雨
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 0859,337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 283求调剂 +22 那个噜子 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 10:41 by 逆水乘风
[考研] 调剂 +12 卷卷卷心菜_ 2026-04-09 13/650 2026-04-10 22:36 by Ftglcn90
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 309求调剂 +14 wdhw 2026-04-10 15/750 2026-04-10 21:06 by zhouxiaoyu
信息提示
请填处理意见