24小时热门版块排行榜    

查看: 1204  |  回复: 2

a13515517892

木虫 (小有名气)

[求助] 关于蛋白表达多个起始密码子的问题求教 已有1人参与

初做蛋白表达的实验,有许多不懂的,最近的实验是蛋白表达,老板说我的序列会移码,我使用的克隆位点是SmaI-ClaI,紧接着SmalI的序列ATGAAAAA……已经有两个起始密码子了,要保证我插入的序列不移码的情况下,在SmaI(cccggg后面加个碱基)这样不会移码,但是翻译出来的蛋白是从哪里开始的呢?

关于蛋白表达多个起始密码子的问题求教
关于蛋白表达多个起始密码子的问题求教.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liubx1006

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用的vector NTI 吗?不知道你的蛋白表达是以上面链为正向,还是以下面链?你所说的SMA1后面的序列ATGAAAAA是3‘到5’顺序的,正常序列不能这么看的。一般的DNA序列是按5‘到3’顺序,即上面的链是正向读,反相链是倒着读。另外,你的酶切位点选的有些近,做酶切的话不一定切彻底了,还有sma1是平末端,25°做酶切,Cla1是37度酶切……
2楼2015-07-03 16:49:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a13515517892

木虫 (小有名气)

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
引用回帖:
2楼: Originally posted by liubx1006 at 2015-07-03 16:49:26
你用的vector NTI 吗?不知道你的蛋白表达是以上面链为正向,还是以下面链?你所说的SMA1后面的序列ATGAAAAA是3‘到5’顺序的,正常序列不能这么看的。一般的DNA序列是按5‘到3’顺序,即上面的链是正向读,反相链是 ...

你还没我专业啊,我最后合成做出来的序列肯定是上面的链按5‘到3’顺序至于其他的什么酶切不完全,这都不是你需要考虑的哦,我可以切开哈
3楼2015-07-03 17:31:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 a13515517892 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 14/700 2026-03-02 16:09 by 今夏不夏
[考研] 295求调剂。一志愿报考郑州大学化学工艺学硕,总分295分 +5 yl1 2026-03-02 5/250 2026-03-02 15:24 by sucesssucess
[考研] 303求调剂 +5 今夏不夏 2026-03-01 5/250 2026-03-02 15:01 by 向上的胖东
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +4 Qwertyuop 2026-03-01 4/200 2026-03-02 14:27 by 升格阿达
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 9/450 2026-03-02 13:31 by njzyff
[考研] 一志愿山东大学材料与化工325求调剂 +3 半截的诗0927 2026-03-02 3/150 2026-03-02 12:58 by houyaoxu
[考研] 材料学硕318求调剂 +14 February_Feb 2026-03-01 16/800 2026-03-02 11:17 by yuchj
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +6 wsl111 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:00 by ydudjddnd
[考研] 0856材料调剂 +4 沿岸有贝壳OUC 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:19 by 公瑾逍遥
[基金申请] 本子写完了,给DS兄弟看了,得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[基金申请] 刚录用,没有期刊号,但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
请填处理意见